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目的探讨金雀异黄素(genistein,GEN)诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的分子机制。方法用0、5、10、20μmol/L GEN处理MDA-MB-231细胞24 h。采用CCK-8、Hoechst 33342染色和流式细胞仪测定不同浓度GEN对MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响。采用Western blotting检测不同浓度GEN处理前后MDA-MB-231细胞中Fas相关死亡域蛋白(FADD)、活性半胱天冬酶8(cleaved caspase-8)、Fas、FasL蛋白表达水平。采用实时RT-PCR分析不同浓度GEN处理前后MDA-MB-231细胞中Fas、FasL基因表达水平。多组均数比较采用方差齐性检验后进行单因素方差分析。结果在GEN作用24 h后,0、5、10和20μmol/L组对MDA-MB-231细胞增殖的抑制率分别为(3.00±1.41)%、(14.02±1.57)%、(27.5±1.52)%、(48.90±1.44)%。与0μmol/L组相比,5、10和20μmol/L组呈浓度依赖性增加(F=528.119,P=0.000)。两两比较显示:各浓度组之间差异均有统计学意义(P<0.05)。0、5、10和20μmol/L组诱导MDA-MB-231细胞的早期凋亡率分别为(3.40±0.40)%、(9.34±1.34)%、(19.26±0.93)%、(27.41±1.12)%。与0μmol/L组相比,5、10和20μmol/L组呈浓度依赖性增加(F=379.573,P=0.000)。两两比较显示:各浓度组之间差异均有统计学意义(P<0.05)。Western blotting结果显示,与0μmol/L组相比,其他浓度组经GEN处理的MDA-MB-231细胞FADD、cleaved caspase-8、FasL蛋白表达升高(F=368.621、456.744、419.129,P均=0.000),Fas蛋白表达差异无统计学意义(F=0.800,P=0.528);与10μmol/L组相比,20μmol/L组FasL蛋白表达降低有统计学意义(F=92.235,P=0.001)。实时RT-PCR结果显示,与0μmol/L组相比,其他浓度组经GEN处理的MDA-MB-231细胞FasL mRNA表达升高(F=646.983,P=0.000),Fas mRNA表达差异无统计学意义(F=1.556,P=0.274);与10μmol/L组相比,20μmol/L组FasL mRNA表达降低有统计学意义(F=52.562,P=0.020)。结论 GEN通过上调Fas/FasL途径中FasL基因表达诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡。