【摘 要】
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目的探讨不同浓度2，4-二硝基氯苯（DNCB）诱导的特应性皮炎（AD）样小鼠模型特点及皮肤菌群改变。方法将30只雄性、无特定病原级BALB/c小鼠按随机数字表法等分为3组：阴性对照组小鼠背部涂抹200 μl丙酮和橄榄油（体积比为3∶1）每周2次，连续6周；高、低浓度DNCB组小鼠于第1周的第1、3天均涂抹1% DNCB 200 μl，第2周起分别涂抹0.5%、0.1% DNCB 200 μl，每周
【机 构】
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北京大学第三医院皮肤科 100191,北京大学基础医学院免疫学系 国家卫生健康委员会医学免疫学重点实验室 100191,北京大学基础医学院免疫学系 国家卫生健康委员会医学免疫学重点实验室 100191
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目的探讨不同浓度2，4-二硝基氯苯（DNCB）诱导的特应性皮炎（AD）样小鼠模型特点及皮肤菌群改变。
方法将30只雄性、无特定病原级BALB/c小鼠按随机数字表法等分为3组：阴性对照组小鼠背部涂抹200 μl丙酮和橄榄油（体积比为3∶1）每周2次，连续6周；高、低浓度DNCB组小鼠于第1周的第1、3天均涂抹1% DNCB 200 μl，第2周起分别涂抹0.5%、0.1% DNCB 200 μl，每周2次，连续5周。末次给药24 h后评估皮损严重程度，测量经表皮水分丢失和角质层含水量。实验结束后处死小鼠，切取背部皮肤行组织病理学检查。每组取3只小鼠背部全层皮肤组织样本，通过Illumina Miseq PE300型高通量测序仪检测小鼠背部皮肤菌群16S rRNA基因V3-V4可变区，并分析皮肤菌群的组成结构及不同菌属相对丰度变化。采用单因素方差分析比较3组间各指标的差异，Games-Howell法进行两两多重比较。
结果高、低浓度DNCB组小鼠皮损严重程度评分分别为（9.83 ± 2.45）分、（2.71 ± 0.56）分，均显著高于阴性对照组[（0.51 ± 0.12）分]，t值分别为-7.19、-2.85，均P < 0.05。高、低浓度DNCB组经表皮水分丢失值均显著高于阴性对照组（t值分别为-7.72，-2.68，均P < 0.05），而角质层含水量显著低于阴性对照组（t值分别为6.77、5.99，均P < 0.05）；高浓度DNCB组经表皮水分丢失值显著高于低浓度DNCB组（t=2.76，P < 0.05），而高、低浓度DNCB组间角质层含水量差异无统计学意义（P > 0.05）。3组间棒状杆菌属相对丰度差异有统计学意义（F=249.85，P < 0.001），高浓度DNCB组棒状杆菌属丰度显著升高。3组小鼠皮肤样本observed species和Chao1指数差异均无统计学意义（均P > 0.05），而高浓度DNCB组Shannon指数显著低于阴性对照组和低浓度DNCB组（t值分别为6.96、-6.37，均P < 0.05）。
结论DNCB可诱导小鼠皮肤形成AD样皮炎，其皮损严重程度、屏障功能受损程度与DNCB浓度相关；高浓度DNCB组小鼠皮肤菌群物种多样性明显下降，高浓度DNCB造模对研究AD的微生物学变化更具优势。
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