【摘 要】
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目的 建立胞内分枝杆菌双抗夹心ELISA检测胞内分枝杆菌生物学新方法.方法 以自主制备的胞内分枝杆菌HBHA单克隆抗体为包被抗体,建立胞内分枝杆菌ELISA检测方法.应用棋盘法优
【机 构】
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长春理工大学生命科学技术学院,吉林长春130022
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目的 建立胞内分枝杆菌双抗夹心ELISA检测胞内分枝杆菌生物学新方法.方法 以自主制备的胞内分枝杆菌HBHA单克隆抗体为包被抗体,建立胞内分枝杆菌ELISA检测方法.应用棋盘法优化检测条件,同时试验对封闭液进行了最佳选择,对检测样品的特异性、敏感性和准确度进行评估.结果 确定抗体包被最佳浓度为4μg/ml,抗鼠血清最佳稀释浓度为1∶400,同时选择P/N值为3.38的1％ BSA作为最佳封闭剂.双抗夹心法对新金分枝杆菌、耻垢分枝杆菌、浅黄分枝杆菌和卡介苗等抗原检测的P/N值均小于2.1,无交叉反应.当菌体浓度为200个/ml时,检测结果仍为阳性,应用该方法检测60份样品中,呈现阳性的菌株为56份,检测准确度高达93.3％.结论 本方法可作为胞内分枝杆菌快速检测和流行病学调查的工具,同时对畜牧业的健康发展提供一种新的技术保障.
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