【摘 要】
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建立一种阿卡斑病毒(Akabane virus,AKAV)的快速、准确、灵敏度高、特异性好的qRT-PCR核酸检测方法.通过对云南流行AKAV毒株的S片段序列进行分析,设计引物和探针,经优化建立A
【机 构】
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云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室,云南 昆明 650224
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建立一种阿卡斑病毒(Akabane virus,AKAV)的快速、准确、灵敏度高、特异性好的qRT-PCR核酸检测方法.通过对云南流行AKAV毒株的S片段序列进行分析,设计引物和探针,经优化建立AKAV qRT-PCR检测方法.优化后的最佳退火温度为60℃,选择制备病毒标准品的AKAV地方毒株(编号55)TCID50效价为10-4.25,通过梯度稀释建立的标准曲线线性关系较好.本方法灵敏度高、特异性好,对不同分离毒株和田间样本检测的结果显示,本方法不仅可以用于实验室鉴定,还可以用于田间样品的临床检测.成功建立了阿卡斑病毒qRT-PCR检测方法.
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