【摘 要】
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目的 研究雷公藤红素(CSL)在胶原诱导性类风湿关节炎(CIA)小鼠骨侵蚀中的作用及其可能的作用机制.方法 将24只DBA/1小鼠分为空白组、模型组(CIA小鼠模型)和实验组(腹腔注射2
【机 构】
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河南大学 护理与健康学院,河南 开封475001;河南大学 第一附属医院 骨科,河南开封475001;河南大学 药学院 中药教研室,河南 开封475001
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目的 研究雷公藤红素(CSL)在胶原诱导性类风湿关节炎(CIA)小鼠骨侵蚀中的作用及其可能的作用机制.方法 将24只DBA/1小鼠分为空白组、模型组(CIA小鼠模型)和实验组(腹腔注射2 mg·kg-1 CSL的CIA小鼠).统计各组小鼠的关节炎指数评分,用苏木精-伊红(HE)染色法评估滑膜炎浸润及骨侵蚀情况,用TRAP染色检测骨组织破骨细胞(OC)数量.从小鼠股骨中分离诱导破骨细胞前体细胞(osteoclast precursors cells,OCPs),采用M-CSF+RNAKL诱导OC分化,分为OCPs组、诱导分化组和CSL低、中、高剂量组(分别用含有0.1,0.25,0.5μmol·L-1 CSL的诱导分化培养基培养).用流式细胞仪检测OCPs的凋亡率;用TRAP染色观察OC数量;用蛋白质印迹(Western blot)法检测Fas/FasL死亡受体途径相关蛋白Fas、FasL、cleaved-caspase-8和cleaved-caspase-3的表达.结果 CSL能够缓解CIA小鼠的关节炎症,抑制炎性细胞的浸润和骨侵蚀,减少OC的数量.OCPs组、诱导分化组和CSL低、中、高剂量组中细胞凋亡率分别为(1.82±0.24)％,(7.98±0.94)％,(8.41±0.84)％,(8.87±0.95)％,(12.57±1.53)％,OC细胞数分别为(0.8±0.7),(84.8±8.9),(70.0±6.6),(46.5±8.2),(32.5±4.6)个.与OCPs组相比,诱导分化组中细胞凋亡率和OC细胞增多(P<0.05).与诱导分化组相比,CSL高剂量组细胞凋亡率升高,而OC细胞数量减少(P<0.05).CSL高剂量组中Fas、FasL、cleaved-caspase-8和cleaved-caspase-3的表达水平显著高于诱导分化组(P<0.05).结论 CSL能够有效缓解CIA小鼠的骨侵蚀作用,其机制可能是CSL激活Fas/FasL死亡受体途径诱导OCPs的凋亡并抑制OC分化,抑制骨破坏的发生.
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