【摘 要】
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目的 研究人阴道上皮细胞转染抗菌肽LL-37和防御素5(HD5)真核重组质粒后对假丝酵母菌的抑制作用及其分泌白细胞介素8(IL-8)水平的变化.方法 原代培养阴道上皮细胞并传代后,分
【机 构】
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天津医科大学第二医院妇科,天津医科大学第二医院内分泌研究所
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目的 研究人阴道上皮细胞转染抗菌肽LL-37和防御素5(HD5)真核重组质粒后对假丝酵母菌的抑制作用及其分泌白细胞介素8(IL-8)水平的变化.方法 原代培养阴道上皮细胞并传代后,分为无菌组和带菌组,每组内再分别转染LL-37质粒pcDNA3.1(+)/LL-37-EGFP、HD5质粒pcDNA3.1(+)/HD5-EGFP及联合转染两种质粒,并设未转染质粒的阴道上皮细胞为对照；带菌组均与假丝酵母菌共培养.于6、12、24、48 h分别收集培养上清液,ELISA方法检测LL-37、HD5及IL-8的水平；采用葡萄糖消耗法检测各组细胞对假丝酵母菌的抑菌效果(以吸光度值表示).结果 (1)各时段检测结果显示,转染质粒的各组细胞分泌LL-37、HD5、IL-8的水平在转染24h时达高峰,然后呈下降趋势,其中带菌组中联合转染细胞分泌LL-37、HD5、IL-8的水平均高于其他细胞,峰值分别为( 100.16±0.81) ng/ml、(58.50±2.08) μg/ml和(101.03±1.59) pg/ml,差异均有统计学意义(P＜0.01).(2)各时段抑菌效果比较显示,无菌组内各细胞的吸光度值比较,差异无统计学意义(P＞0.05),吸光度值呈缓慢下降趋势,其中,联合转染细胞6、12、24、48 h的吸光度值分别为3.610±0.010、3.590±0.010、3.560±0.010、3.530±0.010(P ＞0.05)；带菌组中联合转染细胞吸光度值6、12、24、48 h分别为3.210±0.010、3.150±0.030、3.099±0.030、2.970±0.040,明显高于组内其他细胞,差异有统计学意义(P＜0.01),且下降趋势较其他细胞缓慢.结论 阴道上皮细胞转染LL-37及HD5质粒后抵抗假丝酵母菌的能力增强,LL-37和HD5可诱导炎症趋化因子IL-8的分泌.
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