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【摘要】目的探讨百奥脂乐4个不同剂量对高脂大鼠模型功能的研究。方法采用Wistar大鼠建立脂代谢紊乱模型，设三个剂量组分别是0.27g/kg、0.54g/kg、1.35g/kg，灌胃干预30天后禁食取血，肝脏病理切片，采用生化分析仪检测其对大鼠血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）和高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平，并检测肝脾肾指数，试验期间定期称量体重和饮食。结果百奥脂乐对大鼠的脾肾指数无影响，对肝脏有保护作用，减少脂肪肝的形成；模型组中大鼠的TC和TG与正常组比较显著性的升高（p<0.01），说明模型成立；四个百奥脂乐剂量组（给药组）的TC和TG比模型组显著性的降低（p<0.01），HDL-C比模型组显著性的升高p<0.01。结论百奥脂乐具有增进食欲，减肥、降血脂的作用。
【关键词】百奥脂乐；高脂；模型；功能
2012年3月国际心脑血管病联盟发布的数据结果表明，世界心脑血管病死亡人数占总死亡人口的30.3%。在我国，心脑血管病的发病率和死亡率均居各种疾病之首。据世界卫生部统计，我国城市人口死亡率最高的是心脑血管病，到2015年，几乎有2000万人将死于心血管病，平均每10秒死亡一人。心脑血管疾病已成为严重威胁国人生命健康的公共卫生问题，血清中的胆固醇是心脑血管疾病的罪魁祸首。
现在，由于人们生活水平的提高，膳食中的胆固醇已大大超过美国和我国营养和医学专家推荐食物胆固醇的摄入标准：250mg-300mg/d.人，而正常人一天摄入的胆固醇的量外源性胆固醇为300mg-500mg[1]，人体自身一天可合成1000一1500mg[2]。过量的胆固醇如果不能被转化利用在体内大量的沉积会引起动脉粥样硬化、冠心病、高血压等心脑血管疾病，如何减少胆固醇摄入量、降低人体血清胆固醇水平的研究越来越受到广泛关注[3]。
国内外学者研究证明，在培养基中有降胆固醇作用的乳酸菌[4-6]，服用后能够起到清除胆固醇作用。
红曲米是用红曲霉菌发酵而成，而其有效成份HMG-CoA还原酶的竞争性抑制剂，从而就阻断了合成胆固醇的通路抑制了内源性胆固醇的合成，起到治疗与预防心脑血管疾病、降胆固醇作用；灵芝是药食两用的食品，灵芝孢子粉集灵芝活性成分的精华，其对中枢神经系统的调节作用、促进睡眠；提高人体免疫力，保肝护肝，抗衰老；对多种肿瘤细胞有明显抑制作用；在心血管方面：灵芝孢子粉具有对血压双向调节的作用，它能有效舒张冠状动脉血流量，改善微循环，增加心机供氧，促进血液循环，对急性心肌缺血有保护作用，可减少动脉粥样硬化斑块的形成；山楂为可食用核果类水果，入脾胃、肝经；山楂中的黄酮类、三萜类、有机酸类等物质，对心血管疾病如降血脂、增加冠脉流量、强心降压等具有很好的疗效。本课题是：百奥脂乐（简称脂乐）用经过多次筛选具有胃肠道具有抗性且具有较强降胆固醇能力的嗜热链球（Streptococcus thermophilussBLS7）和植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum BLLP）降低外源性胆固醇，红曲米粉抑制内源性胆固醇的合成，山楂、灵芝孢子粉增强冠脉流量、调节平衡，由以上四种原料复配制成的颗粒剂对高脂大鼠模型的功能研究作用。
1材料与方法
1.1实验动物健康雄性wistar大鼠（150-200g），60只（购于山东鲁抗动物实验中心，许可证号：SCXK（鲁）2008002，动物房为泰山医学院动物试验中心，温度20℃-23℃，相对湿度40%-70%。
1.2主要试剂与原料胆固醇、胆盐（安徽科宝生物工程有限公司），蛋黄粉（安徽省亳州市红日蛋制品有限责任公司），猪油（泰安市财源肉联厂），嗜热链球菌活菌数2.8×1010cfu/g，植物乳杆菌活菌数3.2×1010cfu/g（由本公司菌液车间生产），山楂饮片（泰安永春堂药店）；血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白HDL-C、低密度脂蛋白（LDL-C）测定试剂盒（购于南京建成生物工程研究所，批号：20111103），
高脂饲料配方：78.8%基础饲料、1%胆固醇、10%蛋黄粉和10%猪油、0.2%胆盐，依据卫生部2003年2月颁布的《保健食品检验与评价技术规范》[7]，由山东鲁抗动物实验中心加工生产。
1.3实验仪器L-530离心机（长沙湘仪离心机仪器有限公司），全自动生化分析仪（卓越330全自动生化分析仪）。
1.4试验方法
1.4.1剂量设计与分组益生菌的最大服用剂量目前没有明确的要求，但是，国家卫生部益生菌类保健食品申报与审评规定要求，活菌类益生菌保健食品在其保质期内活菌数目不得少于106cfu/mL（g）。
David等使用中国的红曲等做临床试验，发现红曲有较好的降胆固醇作用，并未发现负面影响，毒副作用低，不产生抗药性。灵芝孢子粉、山楂都是药食同源的食品，长期食用无毒副作用，因此本产品是无毒无副作用的产品。
試验分组：实验选择人体推荐剂量为3g作为一个剂量组-剂量1组，另设人日服量的5倍、10倍量2组、剂量3组，根据不同动物给药剂量的换算，每天罐胃量分别是0.054g，0.108g，0.27g百奥脂乐产品，将其溶入2ml生理盐水中，每天经口一次性灌胃共30天，模型组（空白组）：在基础饲养后换为高脂饲料，每天罐胃2ml的生理盐水，正常组：饲喂基础饲料，罐胃生理盐水2ml，试验过程中根据大鼠体重调整剂量。
1.4.2试验步骤大鼠在实验环境下喂饲基础饲料观察7d，然后取尾血，测定血清总胆固醇（TC），甘油三酯（TG），高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平。根据血清总胆固醇（TC）水平，进行随机分组，四个剂量组在给予高脂饲料的同时给予不同剂量的受试样品进行干预30天，定期称量体重、记录大鼠体征、饮食、饮水，于实验结束禁食16小时，取尾血，室温放置1h，在2000—2500r/min低速离心10min，用移液器吸取上层血清0.5-1mL于离心管中，测血清TC，TG，HDL-C水平，乙醚麻醉大鼠解剖，取肝、脾、肾称重，测肝、脾、肾指数。 1.5數据分析试验数据用SPSS13.0软件处理，计量资料以χ±s表示，用t检验评价试验结果。
2结果与讨论
2.1试验期间各试验组大鼠体征正常，被毛光滑平整、反应敏捷，饮食饮水正常。
3结论
肝脏是大鼠消化、代谢脂类物质的重要器官，由于饮食结构失调，摄入过多的脂肪尤其是动物脂肪后，血清中的总胆固醇含量和甘油三酯也相应的升高。乳酸菌微生态制剂及其发酵食品可以降低人体血清胆固醇的含量[8-9]，百奥脂乐中的乳酸菌通过同化作用、吸附作用会直接或间接地影响大鼠体内脂肪的代谢，进而调节到大鼠血清中胆固醇的含量。而红曲米中的洛伐他汀能够限制胆固醇合成的关键限速酶，因此大鼠在饲喂该药物后，肝脏内的脂肪颗粒数量比模型组少，这和它的作用原理有直接的关系。
通过上面的试验可以看出，百奥脂乐的三个剂量，对大鼠的脾肾指数而言都没有影响，对肝组织有保护作用，降低肝内沉积的脂肪颗粒，三个剂量组中都能够降低血清中的总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、升高高密度脂蛋白（HDL-C），对低密度脂蛋白没有显著的影响。因此，百奥脂乐具有降血脂，预防脂肪肝的作用。
参考文献
[1]汪晓辉.降胆固醇乳酸菌的筛选、鉴定及降解机制的研究[D].浙江工商大学，2010.1.
[2]肖琳琳.乳酸菌降胆固醇作用及机理研究[D].南京：南京农业大学硕士学位论文，2003.
[3]张灏，华伟，郭本恒.乳杆菌耐胆汁、降解结合胆盐和同化胆固醇能力的研究[J].工业微生物，2003，33（2）：23225.
[4]NOH D O，KIM S H，GILLILAND S E.Incorporation of chdesterol into the cellular membrane of Lactobacillus acidophilus ATCC 431211[J].J Dairy Sci，1997，80：3107-3113.
[5]KIMOTO TO H，OHMOMO S，OKAMOTO T，Cholesterol，removal [J] J Dairy Sci，2002，85：3182-3188.
[6]PEREIRA D I A，MCCCAR TNEY A L，GIBSON G R.An in vitro stady of zhe probiotic Potential of a blie-salt-hydrdyzing strain，and deterinotion of its cholesterol-Lowering Properties[J].APPL Environ Microbiol，2003，69：4743-4752.
[7]中华人民共和国卫生部.保健食品检验与评价技术规范（2003年版）[M].北京：清华同方电子出版社，2003.
[8]Lin DC.Probiotics as functional food.Nutr Clin Prant，2003，8（6）：497-506.
[9]Larkin TA，Astheimer LB，Price WE.Dietary combination of soy with a probiotic or Prebiotic food significantly reduces total and LDL cholesterol in mildly hypercholesterolaemic subjects.Eur J Clin NUtr，2007 Oct 17：236-239.
【关键词】百奥脂乐；高脂；模型；功能
2012年3月国际心脑血管病联盟发布的数据结果表明，世界心脑血管病死亡人数占总死亡人口的30.3%。在我国，心脑血管病的发病率和死亡率均居各种疾病之首。据世界卫生部统计，我国城市人口死亡率最高的是心脑血管病，到2015年，几乎有2000万人将死于心血管病，平均每10秒死亡一人。心脑血管疾病已成为严重威胁国人生命健康的公共卫生问题，血清中的胆固醇是心脑血管疾病的罪魁祸首。
现在，由于人们生活水平的提高，膳食中的胆固醇已大大超过美国和我国营养和医学专家推荐食物胆固醇的摄入标准：250mg-300mg/d.人，而正常人一天摄入的胆固醇的量外源性胆固醇为300mg-500mg[1]，人体自身一天可合成1000一1500mg[2]。过量的胆固醇如果不能被转化利用在体内大量的沉积会引起动脉粥样硬化、冠心病、高血压等心脑血管疾病，如何减少胆固醇摄入量、降低人体血清胆固醇水平的研究越来越受到广泛关注[3]。
国内外学者研究证明，在培养基中有降胆固醇作用的乳酸菌[4-6]，服用后能够起到清除胆固醇作用。
红曲米是用红曲霉菌发酵而成，而其有效成份HMG-CoA还原酶的竞争性抑制剂，从而就阻断了合成胆固醇的通路抑制了内源性胆固醇的合成，起到治疗与预防心脑血管疾病、降胆固醇作用；灵芝是药食两用的食品，灵芝孢子粉集灵芝活性成分的精华，其对中枢神经系统的调节作用、促进睡眠；提高人体免疫力，保肝护肝，抗衰老；对多种肿瘤细胞有明显抑制作用；在心血管方面：灵芝孢子粉具有对血压双向调节的作用，它能有效舒张冠状动脉血流量，改善微循环，增加心机供氧，促进血液循环，对急性心肌缺血有保护作用，可减少动脉粥样硬化斑块的形成；山楂为可食用核果类水果，入脾胃、肝经；山楂中的黄酮类、三萜类、有机酸类等物质，对心血管疾病如降血脂、增加冠脉流量、强心降压等具有很好的疗效。本课题是：百奥脂乐（简称脂乐）用经过多次筛选具有胃肠道具有抗性且具有较强降胆固醇能力的嗜热链球（Streptococcus thermophilussBLS7）和植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum BLLP）降低外源性胆固醇，红曲米粉抑制内源性胆固醇的合成，山楂、灵芝孢子粉增强冠脉流量、调节平衡，由以上四种原料复配制成的颗粒剂对高脂大鼠模型的功能研究作用。
1材料与方法
1.1实验动物健康雄性wistar大鼠（150-200g），60只（购于山东鲁抗动物实验中心，许可证号：SCXK（鲁）2008002，动物房为泰山医学院动物试验中心，温度20℃-23℃，相对湿度40%-70%。
1.2主要试剂与原料胆固醇、胆盐（安徽科宝生物工程有限公司），蛋黄粉（安徽省亳州市红日蛋制品有限责任公司），猪油（泰安市财源肉联厂），嗜热链球菌活菌数2.8×1010cfu/g，植物乳杆菌活菌数3.2×1010cfu/g（由本公司菌液车间生产），山楂饮片（泰安永春堂药店）；血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白HDL-C、低密度脂蛋白（LDL-C）测定试剂盒（购于南京建成生物工程研究所，批号：20111103），
高脂饲料配方：78.8%基础饲料、1%胆固醇、10%蛋黄粉和10%猪油、0.2%胆盐，依据卫生部2003年2月颁布的《保健食品检验与评价技术规范》[7]，由山东鲁抗动物实验中心加工生产。
1.3实验仪器L-530离心机（长沙湘仪离心机仪器有限公司），全自动生化分析仪（卓越330全自动生化分析仪）。
1.4试验方法
1.4.1剂量设计与分组益生菌的最大服用剂量目前没有明确的要求，但是，国家卫生部益生菌类保健食品申报与审评规定要求，活菌类益生菌保健食品在其保质期内活菌数目不得少于106cfu/mL（g）。
David等使用中国的红曲等做临床试验，发现红曲有较好的降胆固醇作用，并未发现负面影响，毒副作用低，不产生抗药性。灵芝孢子粉、山楂都是药食同源的食品，长期食用无毒副作用，因此本产品是无毒无副作用的产品。
試验分组：实验选择人体推荐剂量为3g作为一个剂量组-剂量1组，另设人日服量的5倍、10倍量2组、剂量3组，根据不同动物给药剂量的换算，每天罐胃量分别是0.054g，0.108g，0.27g百奥脂乐产品，将其溶入2ml生理盐水中，每天经口一次性灌胃共30天，模型组（空白组）：在基础饲养后换为高脂饲料，每天罐胃2ml的生理盐水，正常组：饲喂基础饲料，罐胃生理盐水2ml，试验过程中根据大鼠体重调整剂量。
1.4.2试验步骤大鼠在实验环境下喂饲基础饲料观察7d，然后取尾血，测定血清总胆固醇（TC），甘油三酯（TG），高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平。根据血清总胆固醇（TC）水平，进行随机分组，四个剂量组在给予高脂饲料的同时给予不同剂量的受试样品进行干预30天，定期称量体重、记录大鼠体征、饮食、饮水，于实验结束禁食16小时，取尾血，室温放置1h，在2000—2500r/min低速离心10min，用移液器吸取上层血清0.5-1mL于离心管中，测血清TC，TG，HDL-C水平，乙醚麻醉大鼠解剖，取肝、脾、肾称重，测肝、脾、肾指数。 1.5數据分析试验数据用SPSS13.0软件处理，计量资料以χ±s表示，用t检验评价试验结果。
2结果与讨论
2.1试验期间各试验组大鼠体征正常，被毛光滑平整、反应敏捷，饮食饮水正常。
3结论
肝脏是大鼠消化、代谢脂类物质的重要器官，由于饮食结构失调，摄入过多的脂肪尤其是动物脂肪后，血清中的总胆固醇含量和甘油三酯也相应的升高。乳酸菌微生态制剂及其发酵食品可以降低人体血清胆固醇的含量[8-9]，百奥脂乐中的乳酸菌通过同化作用、吸附作用会直接或间接地影响大鼠体内脂肪的代谢，进而调节到大鼠血清中胆固醇的含量。而红曲米中的洛伐他汀能够限制胆固醇合成的关键限速酶，因此大鼠在饲喂该药物后，肝脏内的脂肪颗粒数量比模型组少，这和它的作用原理有直接的关系。
通过上面的试验可以看出，百奥脂乐的三个剂量，对大鼠的脾肾指数而言都没有影响，对肝组织有保护作用，降低肝内沉积的脂肪颗粒，三个剂量组中都能够降低血清中的总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、升高高密度脂蛋白（HDL-C），对低密度脂蛋白没有显著的影响。因此，百奥脂乐具有降血脂，预防脂肪肝的作用。
参考文献
[1]汪晓辉.降胆固醇乳酸菌的筛选、鉴定及降解机制的研究[D].浙江工商大学，2010.1.
[2]肖琳琳.乳酸菌降胆固醇作用及机理研究[D].南京：南京农业大学硕士学位论文，2003.
[3]张灏，华伟，郭本恒.乳杆菌耐胆汁、降解结合胆盐和同化胆固醇能力的研究[J].工业微生物，2003，33（2）：23225.
[4]NOH D O，KIM S H，GILLILAND S E.Incorporation of chdesterol into the cellular membrane of Lactobacillus acidophilus ATCC 431211[J].J Dairy Sci，1997，80：3107-3113.
[5]KIMOTO TO H，OHMOMO S，OKAMOTO T，Cholesterol，removal [J] J Dairy Sci，2002，85：3182-3188.
[6]PEREIRA D I A，MCCCAR TNEY A L，GIBSON G R.An in vitro stady of zhe probiotic Potential of a blie-salt-hydrdyzing strain，and deterinotion of its cholesterol-Lowering Properties[J].APPL Environ Microbiol，2003，69：4743-4752.
[7]中华人民共和国卫生部.保健食品检验与评价技术规范（2003年版）[M].北京：清华同方电子出版社，2003.
[8]Lin DC.Probiotics as functional food.Nutr Clin Prant，2003，8（6）：497-506.
[9]Larkin TA，Astheimer LB，Price WE.Dietary combination of soy with a probiotic or Prebiotic food significantly reduces total and LDL cholesterol in mildly hypercholesterolaemic subjects.Eur J Clin NUtr，2007 Oct 17：236-239.