【摘 要】
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目的分析CD40分子活化对肺癌细胞株H1299体外增殖、侵袭能力的影响，探讨磷脂酰肌醇-3-激酶-蛋白激酶B（PI3K-AKT）信号途径在上述过程中的作用。方法细胞计数方法-8（CCK-8）检测CD40分子活化对H1299细胞的增殖效应;划痕实验、Transwell小室模型分析CD40分子活化对H1299细胞侵袭能力的影响；Western印迹检测CD40激发对H1299细胞磷酸化的PI3K-AKT
【机 构】
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目的分析CD40分子活化对肺癌细胞株H1299体外增殖、侵袭能力的影响，探讨磷脂酰肌醇-3-激酶-蛋白激酶B（PI3K-AKT）信号途径在上述过程中的作用。
方法细胞计数方法-8（CCK-8）检测CD40分子活化对H1299细胞的增殖效应;划痕实验、Transwell小室模型分析CD40分子活化对H1299细胞侵袭能力的影响；Western印迹检测CD40激发对H1299细胞磷酸化的PI3K-AKT蛋白表达的调节；酶联免疫吸附（ELISA）法测定CD40对H1299细胞分泌基质金属蛋白酶9（MMP-9）的变化。
结果CCK-8法示5C11组细胞在不同时间其吸光度（A）值均明显提高，在96 h时10.0 mg/L浓度5C11组（2.75±0.35）显著高于对照组（1.72±0.18）（P<0.05）；划痕实验示24 h后5C11组划痕宽度均明显减少，10.0 mg/L浓度5C11组划痕宽度为（0.05±0.01）mm，缩短最明显，与对照组的（1.62±0.32）mm相比，差异有统计学意义（P<0.05）; Western印迹示：5C11激发H1299细胞10 min后磷酸化AKT蛋白开始增加，30 min时非常显著，p-AKT表达（0.65±0.28）与初始状态表达（0.33±0.16）相比，差异有统计学意义（P<0.05)，加入LY294002后，p-AKT水平受到抑制;侵袭实验示5C11组穿过微孔贴于下室的细胞数（168±31）比对照组（105±19）明显增多，差异有统计学意义（P<0.05)，5C11+LY294002组下室细胞数（118±21）与对照组相比差异无统计学意义（P>0.05）；ELISA检测示5C11组MMP-9浓度为（192±31）ng/L，与对照组的（110±23）ng/L相比，差异有统计学意义（P<0.05)，5C11+LY294002组MMP-9浓度为（120±21）ng/L，与对照组相比差异无统计学意义（P>0.05）。
结论CD40分子活化对肺癌细胞H1299具有促进体外增殖、侵袭能力，其机制部分在于CD40分子激发介导的PI3K-AKT信号活化。
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