微紫青霉CBHⅠ基因（Cbh1）在体外无细胞系统中的表达

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：curarchy

【摘要】

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以含Ｃｂｈ１的ｐＵＣ１８－１８１ＤＮＡ为模板，经ＰＣＲ扩增得到带有Ｔ７启动子的Ｃｂｈ１片段，随后在缺乏糖基化的兔网织红细胞裂解液中得到成功表达，表达量为２１．７μｇ／ｍｌ。得到的ＣＢＨⅠ虽未经糖基化修饰，却可水解对硝基酚－β－Ｄ－纤维二糖苷（ｐＮＰＣ），对ｐＮＰＣ的ＫＭ和Ｖｍａｘ分

【作者】

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王景林高培基

【机构】

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山东大学微生物技术国家重点实验室,解放军农牧大学军事兽医研究所

【出处】

：

中国生物化学与分子生物学报

【发表日期】

：

1999年6期

【关键词】

：

微紫青霉无细胞表达系统 Cbh1 基因表达 Penicillium janthinellum Cellobiohydrolase Ⅰ (CBH Ⅰ) Cell

【基金项目】

：

国家自然科学基金

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以含Ｃｂｈ１的ｐＵＣ１８－１８１ＤＮＡ为模板，经ＰＣＲ扩增得到带有Ｔ７启动子的Ｃｂｈ１片段，随后在缺乏糖基化的兔网织红细胞裂解液中得到成功表达，表达量为２１．７μｇ／ｍｌ。得到的ＣＢＨⅠ虽未经糖基化修饰，却可水解对硝基酚－β－Ｄ－纤维二糖苷（ｐＮＰＣ），对ｐＮＰＣ的ＫＭ和Ｖｍａｘ分别为０．８２ｍｍｏｌ／Ｌ和０．０６７μｍｏｌ·ｍｉｎ＾－１·μｇ＾－１，但对羧甲基纤维素钠（ＣＭＣ－Ｎａ）我酶活力。这

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