【摘 要】
：
作为信号接头蛋白CRK家族成员之一,CRKⅡ参与细胞的增殖、存活、黏附、迁移、分化,但CRKⅡ与白血病的关系及作用机制尚不清楚.采用qRT-PCR(quantitative real-time PCR)检测CRKⅡ在正常人外周血样本、非恶性白血病患者骨髓样本、慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)初发患者骨髓样本、CML完全缓解(complete remission,CR)患者骨髓样本中的表达情况;CRKⅡ小干扰序列瞬时转染K562细胞,获得CRKⅡ表达下调的K562
【机 构】
：
大连医科大学基础医学院生物技术系,大连116044;大连医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,大连116044;大连市友谊医院皮肤科,大连116001
论文部分内容阅读
作为信号接头蛋白CRK家族成员之一,CRKⅡ参与细胞的增殖、存活、黏附、迁移、分化,但CRKⅡ与白血病的关系及作用机制尚不清楚.采用qRT-PCR(quantitative real-time PCR)检测CRKⅡ在正常人外周血样本、非恶性白血病患者骨髓样本、慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)初发患者骨髓样本、CML完全缓解(complete remission,CR)患者骨髓样本中的表达情况;CRKⅡ小干扰序列瞬时转染K562细胞,获得CRKⅡ表达下调的K562细胞株,Western blot和qRT-PCR检测CRKⅡ干扰效率;CCK8检测CRKⅡ下调对K562细胞增殖能力的影响;Transwell小室检测CRKⅡ下调对K562细胞迁移、侵袭能力的影响;Western blot检测CRKⅡ下调对K562细胞中信号通路关键分子p130Cas、Rac1表达水平的影响.与正常人外周血样本、非恶性白血病患者骨髓样本相比,CRKⅡ在CML初发患者骨髓样本中表达水平升高,同时在4对CML初发-CR配对样本中,患者完全缓解后CRKⅡ表达水平降低;在K562细胞中CRKⅡ表达被有效沉默;CRKⅡ下调抑制K562细胞的增殖、迁移、侵袭能力.初步分子机制研究发现,CRKⅡ通过激活p130Cas/DOCK180/Rac1通路调节K562细胞的恶性行为.CRKⅡ在CML发生、发展中起着重要的作用,作为肿瘤促进剂影响CML细胞的恶性行为,可作为CML诊断、治疗的新靶点.
其他文献
生物膜结构在细胞生理过程中发挥了重要作用,是目前生命科学研究的前沿领域之一.但在本科生物化学课程教学中,生物膜相关内容较少,特别是关于生物膜不对称性的特点是教学中的薄弱环节.本文以生物膜“流动镶嵌”模型为要点,联系膜脂分子的结构、形状与功能,介绍一种利于同学理解和记忆膜脂分子在双分子层不对称分布的方法.该方法有助于提高教学效果和学生的学习兴趣.
代谢是生命的四大基本特征之一,学好物质代谢才能更好地理解生命和疾病的分子本质.但生物分子结构复杂、内容抽象繁琐、代谢途径交错成网、调控方式多样,是公认的教学难点和学习的“痛点”.本文从五个方面介绍了代谢教学的方法与技巧,通过“五要素法”讲授代谢的共同点,“点线面体”法架构代谢知识框架,串线回顾法达到课堂教学温故而知新,案例导入法提高学习兴趣,推导演绎法让代谢转化变得有规律可循.通过以上方法,化繁为简,增加课程的趣味性和启发性,提升生物化学的教学效果.
胃癌(gastric cancer,GC)是消化道中最常见的恶性肿瘤之一.近年来,尽管在胃癌的诊断和治疗方面均取得了很大进展,但是其发病率和死亡率仍然较高,术后5年生存率低.尽管胃癌诊断和预后的生物标志物在临床应用有一定的指导诊断与治疗价值,但是其敏感性和特异性较差.因此,探索、研究具有高特异性的生物标志物是当今研究的热点.高迁移率族蛋白l(high mobility group box protein 1,HMGB1)是高迁移率族蛋白家族中的重要成员之一,是一种在细胞内具有不同功能的核蛋白,在肿瘤进展、
Wnt信号传导途径在机体生长、发育、代谢等生物学过程中起着重要作用.人体各组织器官的发生发展与Wnt信号传导途径有着密切关系,通路的异常活化参与了人体多种疾病的发展过程.Wnt信号通路以其经典的Wnt/β-catenin信号通路研究最为广泛,Wnt/β-catenin信号通路在角膜发育过程中发挥了至关重要的作用,同时,其异常激活也会导致角膜相关疾病的发生.本文对近年来各学者对Wnt/β-catenin信号通路与角膜发育及其相关疾病的研究进行综述,以期能全面了解Wnt/β-catenin信号通路与角膜发育及
信息交流是动物极其重要的一项功能.不同动物传递信息的方式也有所不同.与高等动物可通过声音、气味、动作等复杂的交流模式不同,低等动物仅拥有简单的神经系统以及初级的信号传导模式.它们之间是否会产生习得能力的交流,这种交流又是如何实现的?这两个问题是本文研究的主要方向.本研究采用秀丽隐杆线虫(C.elegans)作为模式生物,发现将经过学习训练并对特定气味产生趋向性的线虫与未训练过的线虫混合,可以促使未训练过的线虫选择特定气味,表明线虫之间可以传递对气味的偏好信息.进一步研究发现,经过训练的线虫的培养液也可以提
钙池操纵性钙内流(store-operated Ca2+entry,SOCE)是由基质相互作用分子(stromal interaction molecules,STIM)、钙释放激活钙通道蛋白(calcium release-activated calcium channel modulator,Orai)介导的细胞外Ca2+内流过程,在钙库亏空时激活,对骨骼肌生理功能维持具有重要作用.运动通过重塑肌浆网与横小管结构对SOCE进程产生影响,是提高骨骼肌抗疲劳能力的关键.本文将以骨骼肌SOCE进程为核心,梳
帕金森病是常见的神经退行性疾病,主要表现为运动迟缓、静止性震颤和强直等.早期诊断准确率很低,特别容易误诊.早期诊断较为有效的方法是单光子发射计算机断层扫描和脑部正电子发射断层扫描.脑脊液中α-突触核蛋白等成分对于帕金森病的诊断很有效,但脑脊液的获取必须在医院由专业人员操作,创伤性大,因此,更需要开发易于获取的创伤性小的生物标记物.唾液已成为检测疾病生物标记物的良好样本来源,其获得具有无创、无痛和简单程序等多种优势.根据现有研究,有望联合使用唾液中α-突触核蛋白、DJ-1等蛋白分子作为临床诊断生物标记物以协
突触结合蛋白7(synaptotagmin 7,SYT7)是一种钙离子感受器,介导囊泡分泌过程的延迟性非同步释放过程.但SYT7在调控自主神经活动及房颤(atrial fibrillation,AF)发生中的作用尚不清楚.本研究利用CRISPR/Cas9技术构建SYT7基因全身敲除(SYT7 KO)小鼠模型;用尾静脉注射乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)(66μg/mL)+CaCl2(10mg/mL)(注射剂量0.01 mL/10g)诱发小鼠AF;用心电图、小动物心脏超声、免疫组织化学染色、高
肺癌是世界范围内癌症死亡的主要原因之一,且其患病率及死亡率仍呈上升趋势.既往研究认为,八聚体结合转录因子4(octamer-binding transcription factor 4,OCT4)是肿瘤干细胞的特异性标志物,参与调控细胞分化及生长.近年来,研究发现OCT4在包括肺癌在内的多种肿瘤中高表达,这与肺癌的增殖、耐药、浸润、转移等生物学行为相关,因此成为研究肺癌发生及发展的热点.同时,OCT4也有望成为预测肺癌预后的指标以及潜在的治疗靶点.文章主要就OCT4在肺癌中的研究进展进行综述.
几丁质酶3样蛋白1(chitinase-3-likeprotein 1,CHI3L1)也称YKL-40,是一种新发现的肌肉因子,该肌肉因子可在多种细胞分泌包括骨骼肌细胞、巨噬细胞、软骨细胞、平滑肌细胞、内皮细胞、星形胶质细胞等.炎症、运动可调节CHI3L1mRNA的表达.在多种疾病如糖尿病、哮喘、心力衰竭、癌症等的研究中发现,CHI3L1/YKL-40能诱发生物学效应,并且其功能紊乱与疾病的恶化呈正相关.近来,CHI3L1/YKL-40作为炎症、巨噬细胞分化标记物和癌症患者预后的潜在生物标记物引起越来越多