二价金属离子Ca2 + 、Mg2 + 和Mn2 + 能增加重组鱼生长激素 (brGH)与黑鱼肝膜生长激素受体 (GHR)的相互作用 ,其最适浓度为 8～ 12mmol/L。在这一浓度范围 ,Ca2 + 、Mg2 + 和Mn2 + 能分别使专一结合提高到无二价阳离子存在时的 2 30 %、180 %和 2 0 0 %。通过Eadie Scatchard作图对Ca2 + 结合位点进行动态学分析证明brGH 受体复合物存在一个低亲和的Ca2 + 结合位点 ,其Km=0 .384mmol/L。此外 ,在 10mmol/LCaCl2 存在下 ,brGH结合到黑鱼肝膜GHR上的结合常数也从原来 1.0 4× 10 9L·mol-1增加到 1.2 9× 10 9L·mol-1。二硫键还原剂 ,二硫苏糖醇 (DTT)和β 巯基乙醇 (ME)影响brGH与黑鱼肝膜GHR结合作用 ,在放射受体测定体系中加入 0 .1～ 2 0mmol/LDTT或 0 .0 1%～ 1%ME时 ,12 5I brGH的专一性结合是随二硫键还原剂浓度增加而显著增加的。在 0 .8mmol/LDTT或 0 .0 8%ME存在下 ,12 5I brGH专一性结合量分别从 10 .2 %增加到 15 .5 %和 13.2 % ,而结合常数也分别从1.2 6× 10 9L·mol-1增加到 2 .18× 10 9L·mol-1和 1.6 2× 10 9L·mol-1,但是结合容量没有改变。进一步的研究表明 ,DTT和ME引起结合率和结合常数增加是由于brGH和GHR部分二硫键被还原所致。