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摘要 [目的]对薰衣草的离体培养进行研究，为薰衣草新品种新薰二号优良种苗的快速推广种植奠定基础。[方法]以薰衣草茎尖或带腋芽的茎段为外植体，研究不同激素种类与浓度对初代培养、不定芽增殖和不定根形成的影响，并通过试管苗移栽筛选适宜的练苗基质。[结果]初代培养采用MS+0.1 mg/L 6BA+0.1 mg/L NAA有利于植株生长；增殖培养采用MS+2.0 mg/L 6BA+0.1 mg/L NAA有利于芽的发生；生根阶段采用1/2MS+0.5 mg/L NAA有利于生根培养；以蛭石作为练苗基质幼苗成活率可达95%以上。[结论]采用组培法进行薰衣草优良种苗的扩繁，能有效加快新品种的推广。
关键词 薰衣草（Lavandula angustifolia Mill.）；离体培养；培养基
中图分类号 S573+.9 文献标识码
A 文章编号 0517-6611（2014）08-02271-02
Study on in vitro Culture of Lavandula angustifolia Mill.
JIANG Xinming， WANG Pu et al （Agricultural Research Institute of the Fourth Division Xinjiang Production and Construction Corps， Yining， Xinjiang 835000）
Abstract [Objective] Through studying on in vitro culture of Lavandula angustifolia Mill.， so as to lay a foundation for rapid breeding of good varieties of “Xinxun 2”. [Method] Taking stem or tip bud of L. angustifolia as explants， the effects of different external hormone types and concentrations in medium on acclimatization of explants， multiplication of adventitious buds， formation of adventitious roots were studied， and suitable ground substance for transplantation of seedling was screened out. [Result] MS+6BA0.1+NAA0.1 was favorable for acclimatization of explants； MS+6BA2.0+NAA0.1 was good for multiplication of adventitious buds； 1/2 MS+NAA0.5 was suitable for adventitious roots formation. Using vermiculite as transplantation ground substance was beneficial and its seedling survival rate can reach more than 95%. [Conclusion] Taking the way of tissue culture is fit for good seedling production， it can effectively accelerate the promotion of new variety.
Key words Lavandula angustifolia Mill.； in vitro cultivation； Medium
薰衣草（Lavandula angustifolia Mill.）是唇形科薰衣草屬（Lavandula）多年生常绿亚灌木，原产于地中海沿岸、欧洲各地及大洋洲列岛，20世纪60年代由国外引入我国，后经多点试种落户于新疆兵团第四师。薰衣草精油被广泛地应用于医药、美容、洗涤和食品等行业。新疆兵团第四师地处伊犁河谷，薰衣草的栽培种植已有50多年的历史，并成为我国最重要的薰衣草栽培基地，历史和规模在全世界排名第4。割取薰衣草花穗可用于制作干花和提练精油。为了能大面积推广种植新薰二号，让种植户早日增产增收，笔者利用现代生物技术组培法进行优良种苗快繁体系，以期为对薰衣草优良种苗的种质栽培提供依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 研究对象。四师农科所选育的薰衣草新品种新薰二号，经鉴定为唇形科薰衣草属（Lavandula）多年生常绿亚灌木薰衣草（Lavandula angustifolia Mill.）。
1.1.2 主要试剂。所用试剂均为国产分析纯，市售。
1.2 方法
1.2.1 无菌材料的获取。选取新薰二号嫩枝，用流水冲洗30 min，然后剪取新薰二号带腋芽茎段或茎尖1.0 cm左右，用浓度70%的酒精浸泡40 s，然后用浓度0.1%的升汞消毒浸泡5～6 min，取出材料用无菌蒸馏水冲洗5～6次，每次1 min，冲洗完毕用无菌滤纸吸干水分待用。
1.2.2 培养条件。以上培养基均以MS为基本培养基，加入蔗糖3%，琼脂0.7%，PH值调制6.0，在121 ℃高温下灭菌30 m。培养条件为：温度24±2 ℃下培养，光照1 500 Lx，光照时间13 h/d。
1.2.3 初代培养。将切好的外植体材接种到初代培养基上，添加不同浓度6BA（0.1和0.5 mg/L）和NAA（0、0.05和0.1 mg/L），5 d观察1次，培养25 d后统计芽苗生长情况。 1.2.4 继代增殖培养。将长出的嫩芽接种到增殖培养基上，添加不同浓度的6BA（1.0、2.0和3.0 mg/L）和NAA（0.05、0.1和0.5 mg/L），5 d观察一次，培养15 d后统计萌芽率，观察新芽生长情况。
1.2.5 生根培養。将伸长的芽剪成3～4 cm左右的茎段，接种到添加不同激素IBA（0.1、0.5和1.0 mg/L）或NAA（0.1、0.5和1.0 mg/L）的1/2MS培养基上，5 d观察一次，25 d后统计生根数。
1.2.6 试管苗练苗移栽。当试管苗不定根长0.5～1.5 cm，苗高4～7 cm时，从培养瓶中取出，洗净基部培养基.用600～800倍多菌灵稀释液浸泡基部1～2 min后，移栽于不同基质中，3 d观察1次，12 d后统计成活率。试管苗移栽到基质上以后，上方可用塑料薄膜和枝条搭建小型拱棚，保证拱棚内湿度，防止水分过度流失，有效提高薰衣草试管苗成活率。
2 结果与分析
2.1 不同激素组合对薰衣草初代培养的影响 图1表明，接种5 d后，各处理茎段基部膨大，芽尖萌动；10 d后茎节伸长明显，叶片伸展良好；25 d后芽苗长1.5～3.0 cm，有2～4个茎节。由表1可知，25 d后不同处理嫩芽生长情况均比较良好，不同浓度的6BA对芽的增殖数量有一定的影响。经试验比较，初代培养阶段采用MS+0.1 mg/L 6BA+0.1 mg/L NAA有利于植株生长。
2.2 不同激素组合对薰衣草不定芽诱导的影响 根据初代培养阶段不同浓度激素组合作用下芽苗的生长情况，在继代增殖培养过程中增加了6BA浓度。图2表明，接种后5 d后，各处理均出现茎节基部膨大，有少量愈伤组织，嫩芽开始萌动；15 d后，愈伤组织明显增加，各处理丛芽生长正常。由表2可知，芽苗增殖率与6BA的浓度密切相关，在合理范围内，增殖率随着6NA浓度的增加而增加，但6BA浓度过高增殖率反而有所下降。当6BA浓度达到3.0 mg/L时，后期丛芽生长受到抑制，出现玻璃化现象，苏琛在此前的不定芽增殖试验中也出现过类似现象[1]。经比较发现，不定芽诱导阶段采用MS+2.0 mg/L 6BA+0.1 mg/L NAA有利于不定芽的产生，增殖效果好。
2.3 不同激素组合对薰衣草生根培养的影响 图3表明，接种5 d后茎节基部膨大，10 d后出现明显的白色根系，25 d后进行观察对比，处理1和处理4生根效果较差，而且根系较短，其他4个处理生根效果较好，差异不明显。由表3可知，生根阶段采用MS+0.5 mg/L NAA有利于根系生长，与王婵的研究结果相似[2]。
2.4 试管苗练苗移栽 由表4可知，珍珠岩材质较轻，保水能力不强；泥炭土保水能力较强，但用水量不好控制，易发生粘稠现象；蛭石材质疏松，保水能力较强，适宜作为练苗基质
关键词 薰衣草（Lavandula angustifolia Mill.）；离体培养；培养基
中图分类号 S573+.9 文献标识码
A 文章编号 0517-6611（2014）08-02271-02
Study on in vitro Culture of Lavandula angustifolia Mill.
JIANG Xinming， WANG Pu et al （Agricultural Research Institute of the Fourth Division Xinjiang Production and Construction Corps， Yining， Xinjiang 835000）
Abstract [Objective] Through studying on in vitro culture of Lavandula angustifolia Mill.， so as to lay a foundation for rapid breeding of good varieties of “Xinxun 2”. [Method] Taking stem or tip bud of L. angustifolia as explants， the effects of different external hormone types and concentrations in medium on acclimatization of explants， multiplication of adventitious buds， formation of adventitious roots were studied， and suitable ground substance for transplantation of seedling was screened out. [Result] MS+6BA0.1+NAA0.1 was favorable for acclimatization of explants； MS+6BA2.0+NAA0.1 was good for multiplication of adventitious buds； 1/2 MS+NAA0.5 was suitable for adventitious roots formation. Using vermiculite as transplantation ground substance was beneficial and its seedling survival rate can reach more than 95%. [Conclusion] Taking the way of tissue culture is fit for good seedling production， it can effectively accelerate the promotion of new variety.
Key words Lavandula angustifolia Mill.； in vitro cultivation； Medium
薰衣草（Lavandula angustifolia Mill.）是唇形科薰衣草屬（Lavandula）多年生常绿亚灌木，原产于地中海沿岸、欧洲各地及大洋洲列岛，20世纪60年代由国外引入我国，后经多点试种落户于新疆兵团第四师。薰衣草精油被广泛地应用于医药、美容、洗涤和食品等行业。新疆兵团第四师地处伊犁河谷，薰衣草的栽培种植已有50多年的历史，并成为我国最重要的薰衣草栽培基地，历史和规模在全世界排名第4。割取薰衣草花穗可用于制作干花和提练精油。为了能大面积推广种植新薰二号，让种植户早日增产增收，笔者利用现代生物技术组培法进行优良种苗快繁体系，以期为对薰衣草优良种苗的种质栽培提供依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 研究对象。四师农科所选育的薰衣草新品种新薰二号，经鉴定为唇形科薰衣草属（Lavandula）多年生常绿亚灌木薰衣草（Lavandula angustifolia Mill.）。
1.1.2 主要试剂。所用试剂均为国产分析纯，市售。
1.2 方法
1.2.1 无菌材料的获取。选取新薰二号嫩枝，用流水冲洗30 min，然后剪取新薰二号带腋芽茎段或茎尖1.0 cm左右，用浓度70%的酒精浸泡40 s，然后用浓度0.1%的升汞消毒浸泡5～6 min，取出材料用无菌蒸馏水冲洗5～6次，每次1 min，冲洗完毕用无菌滤纸吸干水分待用。
1.2.2 培养条件。以上培养基均以MS为基本培养基，加入蔗糖3%，琼脂0.7%，PH值调制6.0，在121 ℃高温下灭菌30 m。培养条件为：温度24±2 ℃下培养，光照1 500 Lx，光照时间13 h/d。
1.2.3 初代培养。将切好的外植体材接种到初代培养基上，添加不同浓度6BA（0.1和0.5 mg/L）和NAA（0、0.05和0.1 mg/L），5 d观察1次，培养25 d后统计芽苗生长情况。 1.2.4 继代增殖培养。将长出的嫩芽接种到增殖培养基上，添加不同浓度的6BA（1.0、2.0和3.0 mg/L）和NAA（0.05、0.1和0.5 mg/L），5 d观察一次，培养15 d后统计萌芽率，观察新芽生长情况。
1.2.5 生根培養。将伸长的芽剪成3～4 cm左右的茎段，接种到添加不同激素IBA（0.1、0.5和1.0 mg/L）或NAA（0.1、0.5和1.0 mg/L）的1/2MS培养基上，5 d观察一次，25 d后统计生根数。
1.2.6 试管苗练苗移栽。当试管苗不定根长0.5～1.5 cm，苗高4～7 cm时，从培养瓶中取出，洗净基部培养基.用600～800倍多菌灵稀释液浸泡基部1～2 min后，移栽于不同基质中，3 d观察1次，12 d后统计成活率。试管苗移栽到基质上以后，上方可用塑料薄膜和枝条搭建小型拱棚，保证拱棚内湿度，防止水分过度流失，有效提高薰衣草试管苗成活率。
2 结果与分析
2.1 不同激素组合对薰衣草初代培养的影响 图1表明，接种5 d后，各处理茎段基部膨大，芽尖萌动；10 d后茎节伸长明显，叶片伸展良好；25 d后芽苗长1.5～3.0 cm，有2～4个茎节。由表1可知，25 d后不同处理嫩芽生长情况均比较良好，不同浓度的6BA对芽的增殖数量有一定的影响。经试验比较，初代培养阶段采用MS+0.1 mg/L 6BA+0.1 mg/L NAA有利于植株生长。
2.2 不同激素组合对薰衣草不定芽诱导的影响 根据初代培养阶段不同浓度激素组合作用下芽苗的生长情况，在继代增殖培养过程中增加了6BA浓度。图2表明，接种后5 d后，各处理均出现茎节基部膨大，有少量愈伤组织，嫩芽开始萌动；15 d后，愈伤组织明显增加，各处理丛芽生长正常。由表2可知，芽苗增殖率与6BA的浓度密切相关，在合理范围内，增殖率随着6NA浓度的增加而增加，但6BA浓度过高增殖率反而有所下降。当6BA浓度达到3.0 mg/L时，后期丛芽生长受到抑制，出现玻璃化现象，苏琛在此前的不定芽增殖试验中也出现过类似现象[1]。经比较发现，不定芽诱导阶段采用MS+2.0 mg/L 6BA+0.1 mg/L NAA有利于不定芽的产生，增殖效果好。
2.3 不同激素组合对薰衣草生根培养的影响 图3表明，接种5 d后茎节基部膨大，10 d后出现明显的白色根系，25 d后进行观察对比，处理1和处理4生根效果较差，而且根系较短，其他4个处理生根效果较好，差异不明显。由表3可知，生根阶段采用MS+0.5 mg/L NAA有利于根系生长，与王婵的研究结果相似[2]。
2.4 试管苗练苗移栽 由表4可知，珍珠岩材质较轻，保水能力不强；泥炭土保水能力较强，但用水量不好控制，易发生粘稠现象；蛭石材质疏松，保水能力较强，适宜作为练苗基质