含Apoptin基因重组腺病毒的构建及鉴定

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目的:构建携凋亡素(Apoptin)基因重组腺病毒,为进一步研究Apoptin基因抗肿瘤作用分子机制建立基础.方法:利用BamHⅠ和SpeⅠ双酶切质粒pVAX1-Apoptin,获得Apoptin片段并连接入pacAd5CMV K-N pA,构建含Apoptin基因的穿梭质粒pacA d5-Apoptin.利用PacⅠ单酶切对pacAd5-Apoptin和腺病毒基因组质粒(pAd5)进行线性化处理后应用脂质体介导法共转染AAV-293胞.分别利用蚀斑纯化和RT-PCR、Westernblot等方法对重组病
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