【摘 要】
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目的 :研究不同培养条件下口腔黏膜上皮细胞的生长情况 ,了解不同添加成分对上皮细胞生长和分化的影响 ,从而探索一条简便有效的培养口腔黏膜上皮细胞的方法。方法 :选取健康
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目的 :研究不同培养条件下口腔黏膜上皮细胞的生长情况 ,了解不同添加成分对上皮细胞生长和分化的影响 ,从而探索一条简便有效的培养口腔黏膜上皮细胞的方法。方法 :选取健康成年人拔除第三磨牙时切除的牙龈黏膜 ,在超净台内用眼科剪、镊尽可能去除上皮下结缔组织 ,滴加Dispase ,4℃冷消化 1 6～ 1 8h ,取上皮皮片用眼科剪剪成约 1mm3 大小 ,随机分成 1 2组 ,分别接种于 2 5mm培养瓶中 ,每瓶加入培养液 1ml(MCDB1 5 3) ,放入 37℃ ,体积分数为 5 %CO2 细胞培养箱中培养。 1 2组培养液中分别加入不同浓度的胎牛血清、表皮生长因子、胰岛素、氢化可的松、霍乱毒素和转铁蛋白 ,观察细胞生长情况。选取能够正常增殖的细胞进行传代培养 ,并于传代后的第 2d、4d、6d、8d、1 0d、1 2d、1 4d纪录细胞总数。结果 :低血清加入各种生长因子的培养液中上皮细胞生长良好 ,光镜下观察为典型的“铺路石”状 ,传代后经免疫组化证实是上皮细胞 ,而高血清培养液中由于成纤维细胞的生长导致无法传代。结论 :MCDB1 5 3培养液中加入胰岛素、氢化可的松、表皮生长因子和霍乱毒素所构成的培养液 ,是一种有效的口腔黏膜上皮细胞培养液
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