【摘 要】
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目的研究Y-box结合蛋白1（YB-1）与人肝癌耐药细胞Bel-7402/ADM中P糖蛋白（P-gp）的关系,推测其诱导癌细胞产生耐药性的相关机制。方法以浓度梯度递增联合大剂量间断冲击诱导法建立人
【机 构】
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湖北医药学院附属人民医院药学部,湖北医药学院附属人民医院中药药理实验室
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目的研究Y-box结合蛋白1（YB-1）与人肝癌耐药细胞Bel-7402/ADM中P糖蛋白（P-gp）的关系,推测其诱导癌细胞产生耐药性的相关机制。方法以浓度梯度递增联合大剂量间断冲击诱导法建立人肝癌耐药细胞株Bel-7402/ADM;运用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测YB-1、P-gp在人肝癌耐药细胞株Bel-7402/ADM和相应敏感株mRNA含量;采用Western blotting检测YB-1、P-gp在两种细胞株的表达量;将YB-1 siRNA转染耐药细胞,检测转染前后YB-1和MDR1在mRNA水平和蛋白水平的变化。结果多柔比星对Bel-7402和Bel-7402/ADM的半数抑制浓度（IC50）值分别为（2.23±0.07）和（7.02±0.03）μmol·L-1。耐药组MDR1 mRNA的表达量高于亲本细胞（P<0.01）,YB-1 mRNA的表达量也显著高于亲本细胞（P<0.01）。耐药组P-gp表达量高于亲本细胞（P<0.05）,YB-1表达量也显著高于亲本细胞（P<0.01）。耐药细胞转染siRNA后YB-1 mRNA、MDR1 mRNA的表达显著降低（P<0.01）,YB-1、MDR1蛋白水平较转染前显著降低（均P<0.05）。结论 YB-1表达与P-gp表达密切相关,YB-1与人肝癌耐药细胞株Bel-7402/ADM多药耐药相关。
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