【摘 要】
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构建多肿瘤抑制基因p16(mts-1)的逆转录病毒载体,用一种简便的非放射性杂交方法,从多个包装细胞克隆中筛选出病毒滴度高的克隆,以提高病毒转导效率.以p16 cDNA全长为目的基因
【机 构】
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北京医科大学附属人民医院血研所,北京,100044
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构建多肿瘤抑制基因p16(mts-1)的逆转录病毒载体,用一种简便的非放射性杂交方法,从多个包装细胞克隆中筛选出病毒滴度高的克隆,以提高病毒转导效率.以p16 cDNA全长为目的基因,构建逆转录病毒载体pLMSN,非脂质体转染试剂转染兼性包装细胞PT67,G418筛选抗性克隆,扩增单个克隆后提取包装细胞上清的病毒RNA(vRNA),以碱性磷酸酶直接标记的目的基因为探针作斑点杂文,化学发光自显影法定量测定,在短时间内从多个候选克隆中筛选出高产毒的克隆.为p16基因治疗的实验研究奠定了物质基础.
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