吴茱萸碱通过NF-κB-p65信号通路抑制人结肠癌细胞SW480的迁移和侵袭

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目的探讨吴茱萸碱(evodiamine,EVO)对人结肠癌细胞SW480迁移与侵袭的影响,并初步探究其潜在的分子机制。方法以CCK-8法测定不同浓度(0、0.375、0.75、1.5、3、6、12μmol/L)的EVO对SW480细胞处理不同时间(24、48、72 h)的增殖抑制作用;以划痕实验检测EVO对SW480细胞迁移的影响;Transwell实验检测EVO对SW480细胞侵袭的影响;Western blot检测IκBα、p-IκBα、NF-κB-p65、p-NF-κB-p65、MMP-9、MMP-2、MMP-13等蛋白的表达水平;免疫荧光实验检测EVO作用于SW480细胞后p-NF-κB-p65和MMP-9的蛋白表达情况;NF-κB-p65的激活剂LPS预处理SW480细胞后,Western blot检测EVO对IκBα、p-IκBα、NF-κB-p65、p-NF-κB-p65、MMP-9、MMP-2等蛋白表达的影响。结果 EVO呈时间及浓度依赖性抑制SW480细胞的增殖;经EVO作用后,SW480细胞的迁移能力下降(P<0.01),侵袭能力下降,呈浓度依赖性(P<0.01);EVO可以抑制NF-κB-p65信号通路(P<0.05);EVO对NF-κB-p65的抑制作用能被LPS削弱(P<0.05)。结论 EVO能抑制SW480细胞的迁移和侵袭,其机制可能是通过抑制IκBα的磷酸化,进而抑制NF-κB-p65的磷酸化,最终抑制下游基因MMP-9的表达。
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