【摘 要】
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目的:构建pcDNA3.1-Rap2b真核表达载体,以外源基因Rap2b转染NIH3T3细胞,以了解该基因对NIH3T3细胞AKT、ERK、JNK和P38信号传导通路的影响,为探讨该基因在人肺癌发生中的作用
【机 构】
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郑州大学公共卫生学院卫生毒理学教研室河南郑州450001湛江市职业病防治所广东省524018中国医学科学院肿瘤研究所北京100021
【出 处】
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中国环境诱变剂学会致癌专业委员会09年学术会议
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目的:构建pcDNA3.1-Rap2b真核表达载体,以外源基因Rap2b转染NIH3T3细胞,以了解该基因对NIH3T3细胞AKT、ERK、JNK和P38信号传导通路的影响,为探讨该基因在人肺癌发生中的作用提供实验依据。
方法:构建人Rap2b真核表达载体pcDNA3.1-Rap2b并稳定转染NIH3T3 cell,利用westernblotting方法对转染的细胞进行AKT、ERK、JNK和P38磷酸化蛋白及总蛋白表达水平检测。
结果:转染pcDNA3.1-Rap2b质粒的细胞与转染空质粒pcDNA3.1的细胞相比,其AKT、ERK、JNK磷酸化蛋白表达水平差异无统计学意义(p>0.05),而P38磷酸化蛋白表达水平明显上调(p<0.05)。
结论:Rap2b基因外源性高表达可能对P38通路有活化作用,对JNK、ERK、AKT通路无活化作用。
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