插入CpG序列的乙肝病毒核心抗原基因真核表达质粒的构建及在树突状细胞中的表达

来源 :中西医结合肝病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wenliang729
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目的:构建pEGFP—N1/CpG-HBcAg(ISS)真核表达载体,探讨乙肝病毒核心抗原(HBcAg)在树突状细胞(DC)中的表达,为研制乙肝治疗性疫苗奠定基础。方法:根据HBcAg基因序列,设计合成两对引物,在引物中引入针对人敏感的CpG基序和不合CpG的片段,用PCR方法从慢性乙型肝炎患者血清HBVDNA中扩增出HBcAg基因片段,将扩增产物与pEGFP—N1连接,构建重组体pEGFP—N1/CpG-HBcAg,进行酶切、PCR及测序鉴定;分离人外周血单个核细胞(PBMC),体外诱导分化为DC,通过
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