【摘 要】
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目的 获得融合TAT短肽的融合蛋白GST—TAT-GFP，以用于阐明TAT短肽的跨膜递送机理。方法 以质粒pGEX—GFP为模板，扩增目的基因TAT—GFP，将其克隆至质粒pGEX-2T，用所构建的质粒pGEX
【机 构】
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福建省肿瘤医院放射生物学研究室,福州大学生物工程研究所
【基金项目】
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福建省自然科学基金重大科技项目(2001F009);福州大学发展基金资助项目[2002-XY-11XJY-0241XKJ(QD)-0132]
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目的 获得融合TAT短肽的融合蛋白GST—TAT-GFP，以用于阐明TAT短肽的跨膜递送机理。方法 以质粒pGEX—GFP为模板，扩增目的基因TAT—GFP，将其克隆至质粒pGEX-2T，用所构建的质粒pGEX—TAT—GFP转化大肠杆菌BL21并诱导表达，利用GS-4B亲和柱进行纯化，所得产物进行SDS-PAGE、Western blot及细胞跨膜实验鉴定。结果 大肠杆菌细胞经诱导高效表达出约54．3kD的蛋白，其相对分子质量与GST—TAT-GFP融合蛋白相符；Western blot显示该融合蛋白能
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