提高bFGF基因表达水平的策略及其表达产物的纯化工艺

来源 :中国肿瘤生物治疗杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jueduizhi
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目的:通过在同一个表达载体pLX1上调整SD序列和ATG之间距离,以提高bFGF目的蛋白表达量。方法:以Klenow和MungBean Nuclease通过增加2个及减少2个碱基调整SD序列和ATG之间距离,SDS-PAGE和Western blot检测目的蛋白表达量,以高压液相疏水层析、凝胶过滤及肝素亲和层析纯化目的蛋白、MTT法进行活性测定。结果:获得了重组质粒pLX2,pLX3,诱导后与表达质粒pLX1(7.78%)相比,表达量分别为8.03%,9.9%,经纯化后获得的bFGF纯度达98%,ED50
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