【摘 要】
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在添加500U/mL nisin和溴甲酚紫的GM17选择性培养基上,分离到5株nisin抗性菌株.根据形态观察,生理生化特性和16S rDNA基因序列比对被鉴定为乳酸乳球菌.根据已报道nisin抗性基
【机 构】
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山东大学微生物技术国家重点实验室,山东,济南,250100
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在添加500U/mL nisin和溴甲酚紫的GM17选择性培养基上,分离到5株nisin抗性菌株.根据形态观察,生理生化特性和16S rDNA基因序列比对被鉴定为乳酸乳球菌.根据已报道nisin抗性基因设计引物,分别以这5株菌的染色体和质粒DNA为模板进行PCR扩增,结果从1株抗性菌株的染色体上得到目的基因产物.通过序列测定和同源性比对,证明为nisin抗性基因(nsr).将nsr基因克隆到乳酸菌-大肠杆菌穿梭质粒pTRKH2上,重组质粒命名为pT-nsr.pT-nsr电转化乳酸乳球菌MG1614,获得的重组菌MG1614/pT-nsr在含有500U/mL nisin的培养基中生长情况良好.这表明nsr基因赋予宿主菌抗nisin特性,并且与红霉素抗性功能相同,因此nsr基因可以作为筛选标记用于食品级载体的构建.
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