观察解整合素样金属蛋白酶8(ADAM8)基因对结肠癌HCT8细胞增殖及增殖信号转导途径磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)的影响。
方法体外培养结肠癌HCT8细胞，构建含ADAM8基因过表达质粒载体和ADAM8基因RNA干扰质粒载体；转染至HCT8细胞，分为过表达组、干扰组和对照组。采用5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)和3-(4，5-二甲基吡啶-2-基)-5-(3-羧基甲氧基苯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑(MTS)方法检测细胞增殖，PI3K酶活检测试剂盒检测细胞内PI3K酶活，Western blot方法检测细胞内Akt、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)相对表达量和mTOR的表达量。
结果(1)过表达组ADAM8表达量显著高于对照组(t＝1.143，P＝0.035)，而干扰组ADAM8的表达量显著低于对照组(t＝1.203，P＝0.027)，说明过表达载体和干扰表达载体构建成功。(2)过表达组细胞增殖能力[(1.31±0.15) copies/ml]显著高于对照组[(1.00±0.10) copies/ml，t＝1.157，P＝0.033]，干扰组细胞增殖能力[(0.71±0.09) copies/ml]显著低于对照组[(1.00±0.10) copies/ml，t＝1.172，P＝0.031]。(3)与对照组比较，过表达组和干扰组细胞内PI3K的酶活变化差异无统计学意义。ADAM8过表达后细胞内p-Akt表达量增加，被干扰表达后p-Akt表达量降低，差异有统计学意义(t＝1.319，P＝0.018)。ADAM8过表达后细胞内mTOR表达量增加，被干扰表达后mTOR表达量降低，差异有统计学意义(t＝1.390，P＝0.014)。
结论ADAM8可通过增强Akt的磷酸化和mTOR的表达促进HCT8细胞增殖。