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用HpaⅠ和Bg1Ⅱ双酶切32kbHBVDNA,得到近11kb大小的完整HBx基因,利用绿豆芽核酸酶将HBx基因、载体pBR322的BamHⅠ酶切粘性末端切成平末端,在T4DNA连接酶作用下进行体外重组后转化到大肠杆菌中,获得亚克隆E.coliJM109pBR322HBx,并经药物平板