【摘 要】
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为快速检测食源性动物中沙拉沙星及二氟沙星的药物残留,将沙拉沙星单克隆抗体(SAR-Ab)与辣根过氧化物酶(HRP)偶联得到酶标抗体(McAb-HRP),从而建立直接竞争化学发光酶联免疫(dc-CLEIA)检测方法.结果 显示:经紫外扫描鉴定,McAb-HRP偶联成功;以包被抗原(SAR-1-OVA)浓度1.25 μg/mL,McAb-HRP稀释比1∶8000作为最佳工作条件,从而建立了dc-CLEIA分析法;精密度的平均批内批间变异系数均低于7％;建立的标准曲线呈线性关系,线性范围为0.312～20 ng
【机 构】
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中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241;南京农业大学动物医学院,江苏南京210095;中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241;南京农业大学动物医学院,江苏南京210095
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为快速检测食源性动物中沙拉沙星及二氟沙星的药物残留,将沙拉沙星单克隆抗体(SAR-Ab)与辣根过氧化物酶(HRP)偶联得到酶标抗体(McAb-HRP),从而建立直接竞争化学发光酶联免疫(dc-CLEIA)检测方法.结果 显示:经紫外扫描鉴定,McAb-HRP偶联成功;以包被抗原(SAR-1-OVA)浓度1.25 μg/mL,McAb-HRP稀释比1∶8000作为最佳工作条件,从而建立了dc-CLEIA分析法;精密度的平均批内批间变异系数均低于7％;建立的标准曲线呈线性关系,线性范围为0.312～20 ng/mL,回归方程式y=-0.373x+0.688 (R2=0.985),经计算其灵敏度IC50为3.19 ng/mL;除二氟沙星外与其他氟喹诺酮类药物的交叉反应率均低于8％,与其他种类的抗生索均无交叉反应;沙拉沙星和二氟沙星在鸡肉样品中的最低检出限分别为1.25、1.36 μg/kg;沙拉沙星和二氟沙星在鸡肉样品中的添加回收率分别为88.2％～ 108.3％、93.36％～102.7％,且其变异系数均≤13.4％.结果 表明:此方法不仅快速且灵敏度高,可作为沙拉沙星及二氟沙星药物残留的定量检测方法.
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