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目的探讨阴道自取样人乳头瘤病毒（HPV）宫颈癌筛查模式的有效性及联合宫颈细胞学p16INK4a检测的价值。方法 2018年10—11月对贵州三都水族自治县和北京市门头沟地区3 905名30～59岁女性进行阴道自取样HPV宫颈癌筛查和宫颈细胞学p16INK4a蛋白检测;对14种高危型HPV和p16INK4a蛋白阳性者转诊阴道镜及定位活检,分析高危型HPV和p16INK4a检出宫颈高级别病变（HSIL）及联合检测的效果。结果①3 905名女性阴道自取样本的合格率为100%,14种HPV阳性率16.08%（628/3 905）,其中门头沟地区HPV阳性率16.45%（334/2 031）,三都水族自治县HPV阳性率15.69%（294/1 874）;单一HPV感染占72.77%（457/628）;前5位HPV型别依次是HPV52、HPV16、HPV 58、HPV39和HPV68。②593例阴道镜下活检患者中,检出HSIL及以上病变62例（10.46%）,其中HPV阳性61例（98.39%,61/62）,包括HPV16/18阳性38例（62.30%,38/61）,非HPV16/18阳性23例（37.71%,23/61）,不同级别病变HPV阳性率比较,差异有统计学意义（P <0.01）;③宫颈HSIL及以上病变、LSIL和宫颈炎中p16INK4a蛋白表达的阳性率分别是90.33%、37.64%和19.27%（P <0.001）,其检出宫颈HSIL及以上病变的敏感度、特异度、阴性预测值和准确度分别是90.33%、74.58%、98.51%和76.23%,其假阳性率（25.43%）明显低于HPV检测（80.04%）（P <0.001）;HPV阳性联合p16INK4a检测,在保持高敏感度（90.17%）的同时,特异度（83.46%）、准确度（84.30%）明显升高（P <0.05）,假阳性率（16.55%）明显降低（P <0.05）。结论阴道自取样HPV检测宫颈癌筛查模式是可行的,可作为传统筛查模式的补充。宫颈细胞学p16INK4a蛋白检测可用于对自取样HPV阳性/非HPV16/18的分流或精准筛查的方法。