【摘 要】
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目的探讨p21活化激酶4(PAK4)蛋白对乳腺癌细胞凋亡、侵袭迁移和上皮-间充质转化(EMT)的影响。方法选取2018年7月至2019年7月河南省人民医院收治的175例乳腺癌和癌旁组织作为研究对象，采用免疫组织化学分析PAK4蛋白表达水平。MCF-7细胞随机分为两组，采用慢病毒介导PAK4短发卡RNA(shRNA)和对照shRNA感染细胞，分别为PAK4 KD组和对照组。采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧
【机 构】
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目的探讨p21活化激酶4(PAK4)蛋白对乳腺癌细胞凋亡、侵袭迁移和上皮-间充质转化(EMT)的影响。
方法选取2018年7月至2019年7月河南省人民医院收治的175例乳腺癌和癌旁组织作为研究对象，采用免疫组织化学分析PAK4蛋白表达水平。MCF-7细胞随机分为两组，采用慢病毒介导PAK4短发卡RNA(shRNA)和对照shRNA感染细胞，分别为PAK4 KD组和对照组。采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)凋亡检测试剂盒和TUNEL染色分析两组细胞凋亡水平；采用划痕实验分析两组细胞迁移；采用Transwell分析两组细胞侵袭能力；采用蛋白质印迹法(Western blot)分析两组上皮细胞标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)、β-连环素(β-catenin)和间充质标志物波形蛋白(Vimentin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)表达水平。应用SPSS 17.0统计学软件分析，组间比较采用t检验。
结果癌旁组织PAK4平均阳性面积(72.49±8.90)明显低于乳腺癌肿瘤组织PAK4平均阳性面积(258.12±29.21)，差异有统计学意义(t＝8.190，P<0.05)。对照组乳腺癌细胞凋亡比例[(2.81±0.94)%]明显低于PAK4 KD组乳腺癌细胞凋亡比例[(19.36±4.27)%]，差异有统计学意义(t＝5.109，P<0.05)。对照组乳腺癌细胞TUNEL染色阳性率[(4.31±0.86)%]明显低于PAK4 KD组乳腺癌细胞TUNEL染色阳性率[(24.21±6.02)%]，差异有统计学意义(t＝7.119，P<0.05)。对照组细胞划痕愈合率[(90.45±8.92)%]明显高于PAK4 KD组乳腺癌细胞划痕愈合率[(53.44±6.18)%]，差异有统计学意义(t＝10.312，P<0.05)。对照组细胞侵袭数量[(154.22±14.38)个]明显高于PAK4 KD组乳腺癌细胞侵袭数量[(89.23±9.02)个]，差异有统计学意义(t＝9.112，P<0.05)。对照组细胞上皮细胞表型标志物E-cadherin表达水平(0.61±0.21)明显低于PAK4 KD组乳腺癌细胞(1.24±0.28)，差异有统计学意义(t＝3.981，P<0.05)。对照组细胞间质细胞表型标志物Vimentin和N-cadherin表达水平(1.77±0.31、1.29±0.19)明显高于PAK4 KD组乳腺癌细胞(1.02±0.21、0.79±0.15)，差异有统计学意义(t＝3.209、3.001，P<0.05)。
结论PAK4蛋白在乳腺癌组织中呈高表达，参与乳腺癌细胞凋亡、迁移、侵袭和EMT等过程。
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