ENC1的克隆,原核表达与数种细胞系表达谱分析

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:THE_BOSS
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以人3月胎脑总RNA为模板,用RT-PCR方法得到了ENC1(ectoderm-neural cortex-1) 基因的cDNA,经测序证实该cDNA的长度为1800bp,包含ENC1的完整编码区。将之克隆入pGEX-4T-1载体构建重组表达质粒,转化大肠杆菌BL21表达,经Sepharose 4B纯化得到目的蛋白。通过Northern印迹和RT-PCR检验了该基因在数种细胞系中的表达,结果表明其在神经胶质母细胞瘤细胞系U451中有较高的表达,而在包括神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y的其他数种细胞系中无表
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