【摘 要】
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目的建立实验动物泰泽病原位杂交检测方法.方法用已感染Tyzzer菌小鼠的3T3细胞(MT-3T3细胞)感染4周龄的ICR小鼠,以4.0×105细胞量感染动物,动物于感染后4～7 d发病.根据Tyz
【机 构】
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中国医学科学院实验动物研究所中国协和医科大学实验动物学部
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目的建立实验动物泰泽病原位杂交检测方法.方法用已感染Tyzzer菌小鼠的3T3细胞(MT-3T3细胞)感染4周龄的ICR小鼠,以4.0×105细胞量感染动物,动物于感染后4～7 d发病.根据Tyzzer菌16 srDNA序列设计出两对特异引物,以MT-3T3细胞的DNA提取物为模板,进行套式PCR.扩增出Tyzzer菌特有的196bp条带.以此产物为探针,用地高辛PCR一步法进行探针标记.选择感染动物的肝脏,采用不同探针浓度进行原位杂交.结果当探针的最小浓度为40 ng/μl时,在肝细胞的胞质中
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