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【关键词】MicroRNA-23b;脓毒症;血管内皮细胞炎症因子表达;调节机制
【中图分类号】R459.7 【文献标识码】B 【文章编号】1002-8714(2019)12-0088-01
脓毒症是由于急性感染所导致的炎症反应综合症,是造成患者死亡的重要病因。MicroRNA-23是最新发现的Micro RNA,能够对细胞内信号通路进行调节,从而对细胞增殖、分化和组织黏附造成影响[1]。按照相关研究可以看出,MicroRNA-23在肿瘤中为低表达,可以对肿瘤细胞增殖起到抑制作用。此次研究主要是探讨分析MicroRNA-23b对脓毒症血管内皮细胞炎症因子表达的调节机制,现将此次研究报告做如下汇报。
1.1实验资料
选择脐静脉内皮细胞、RPMI-1640 培养基、胎牛血清、胰蛋白酶、细菌LPS、抑制剂、光学显微镜。
1.2方法
(1)细胞培养与转染:使用RPMI-1640 培养基,置入二氧化碳(5%)培养箱,温度控制在37摄氏度,待至细胞生长贴壁达到融合状态,使用胰蛋白酶(0.25%)消化细胞,备用。使用转染试剂将mimics 及inhibitor和阴性对照转染到细胞内,划分为mimics组,mimics阴性对照组,inhibitor组,inhibitor阴性对照组。培养24h后测定指标。
(2)通过CCK-8法对不同组细胞增殖能力进行检测,选取四组细胞,接种在96孔板上,每组设置三个重复,并且设置空白对照孔,在培养24h和48h后弃去培养基,使用不含有胎牛血清的培养基,添加CCK-8试剂,培养2h后,使用酶标仪进行检测,计算抑制率[2]。
(3)MicroRNA-23b对脓毒症血管内皮细胞炎症因子表达的影响。将四组细胞转染处理后,使用胰蛋白酶(0.25%)消化细胞,备用。离心处理后收集细胞,并且使用生理盐水进行洗涤。提取细胞DNA,反转录为cDNA,通过PCR芯片法,对炎症细胞因子表达情况进行检测。
1.3统计学方法
采用专业统计学软件(SPSS20.0)处理和分析所有患者数据资料,采用x2检验计数资料,并且使用百分比表示,采用t检验计量资料,并且使用均数标准差表示,P
【中图分类号】R459.7 【文献标识码】B 【文章编号】1002-8714(2019)12-0088-01
脓毒症是由于急性感染所导致的炎症反应综合症,是造成患者死亡的重要病因。MicroRNA-23是最新发现的Micro RNA,能够对细胞内信号通路进行调节,从而对细胞增殖、分化和组织黏附造成影响[1]。按照相关研究可以看出,MicroRNA-23在肿瘤中为低表达,可以对肿瘤细胞增殖起到抑制作用。此次研究主要是探讨分析MicroRNA-23b对脓毒症血管内皮细胞炎症因子表达的调节机制,现将此次研究报告做如下汇报。
1 资料与方法
1.1实验资料
选择脐静脉内皮细胞、RPMI-1640 培养基、胎牛血清、胰蛋白酶、细菌LPS、抑制剂、光学显微镜。
1.2方法
(1)细胞培养与转染:使用RPMI-1640 培养基,置入二氧化碳(5%)培养箱,温度控制在37摄氏度,待至细胞生长贴壁达到融合状态,使用胰蛋白酶(0.25%)消化细胞,备用。使用转染试剂将mimics 及inhibitor和阴性对照转染到细胞内,划分为mimics组,mimics阴性对照组,inhibitor组,inhibitor阴性对照组。培养24h后测定指标。
(2)通过CCK-8法对不同组细胞增殖能力进行检测,选取四组细胞,接种在96孔板上,每组设置三个重复,并且设置空白对照孔,在培养24h和48h后弃去培养基,使用不含有胎牛血清的培养基,添加CCK-8试剂,培养2h后,使用酶标仪进行检测,计算抑制率[2]。
(3)MicroRNA-23b对脓毒症血管内皮细胞炎症因子表达的影响。将四组细胞转染处理后,使用胰蛋白酶(0.25%)消化细胞,备用。离心处理后收集细胞,并且使用生理盐水进行洗涤。提取细胞DNA,反转录为cDNA,通过PCR芯片法,对炎症细胞因子表达情况进行检测。
1.3统计学方法
采用专业统计学软件(SPSS20.0)处理和分析所有患者数据资料,采用x2检验计数资料,并且使用百分比表示,采用t检验计量资料,并且使用均数标准差表示,P