【摘 要】
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目的建立活体实验动物中嗜肺巴斯德杆菌的实时快速、灵敏简便的PCR检测方法。方法通过比较不同样本采集及处理方法,优化样本的处理流程,简化DNA的提取步骤,快速获取PCR模板后
【机 构】
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上海交通大学实验动物中心,上海市西南位育中学国际部
【基金项目】
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上海交通大学决策咨询课题(JCZXSJB2018-024)
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目的建立活体实验动物中嗜肺巴斯德杆菌的实时快速、灵敏简便的PCR检测方法。方法通过比较不同样本采集及处理方法,优化样本的处理流程,简化DNA的提取步骤,快速获取PCR模板后对嗜肺巴斯德杆菌Jawetz型和Heyl型进行PCR扩增,并结合测序进行鉴定。结果4种采样方法中,口腔样本的检测效果最好;2种DNA提取方法中,用培养后煮沸1 min的方法能快速获取样本中细菌基因组DNA,比试剂盒提取方法效果更好。结论通过培养煮沸1 min的方法快速提取实验动物口腔样本中的细菌基因组DNA作为PCR模板,能显著提高嗜肺
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