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目的：实现贵阳腐霉（Pythium guiyangense Su）类枯草菌素蛋白酶（subtilisin-like protease,Pr1）基因在大肠杆菌中的活性表达,验证已获得的基因序列（YP1977）是否属于subtilisin-like protease基因家族成员。方法：（1）提取贵阳腐霉总RNA,以已获得的序列（YP1977）为模版设计引物,利用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术扩增Pr1基因ORF片段;（2）构建含有Pr1基因ORF序列、绿色荧光蛋白基因ORF序列的重组质粒pTWIN1-