生长抑素(SS)基因在大肠杆菌pT7ZZ表达系统中的克隆与表达

来源 :中国生物制品学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yu_jixing
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目的构建和筛选既能稳定、高效表达SS融合蛋白,又能使这种融合蛋白保持良好的SS抗原性和高水溶性等特点的重组质粒.方法用BamH I/Xho I(B/X)和BamH I/EcoR I(B/E)双酶切,将含有SS基因的片段由pThioHis A中切出,然后分别克隆到pT7ZZa中的相应酶切位点,得到pSSB/X(短尾)和pSS-B/E(长尾)两个重组质粒,用常规表达技术在大肠杆菌中对其进行表达.结果 pSS-B/X和pSS-B/E两个重组质粒在宿主菌BL21(DE3)中均获得表达,pSS-B/X获得高效表达,SS融合蛋白占菌体总蛋白的30.6%.两个表达菌经超声裂解后电泳发现,SS-B/X-ZZ和SS-B/E-ZZ这两种融合蛋白基本为可溶性蛋白,沉淀中含量极低.二者均具有良好的抗原性.结论 pSS-B/X重组质粒很有希望成为SS基因疫苗的候选质粒.
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