【摘 要】
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探讨构建人脂多糖诱导肿瘤坏死因子释放因子（LITAF）基因的过表达慢病毒载体的技术方法,并检测其体外表达目的基因的水平。设计LITAF基因引物,应用聚合酶链反应（PCR）的方法扩增LIT
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探讨构建人脂多糖诱导肿瘤坏死因子释放因子（LITAF）基因的过表达慢病毒载体的技术方法,并检测其体外表达目的基因的水平。设计LITAF基因引物,应用聚合酶链反应（PCR）的方法扩增LITAF基因片段;应用EcoRI、Bam HI酶切LV8载体,通过连接酶将LITAF基因片段连接至线性化的LV8载体上,应用酶切及测序方法鉴定LITAF-LV8重组质粒,将其包装慢病毒后感染293T细胞（人胚肾细胞）,观察绿色荧光蛋白（GFP）的表达,验证后感染肝癌细胞株HepG2。RT-PCR和Westernblot鉴定感染
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