一种同时分离肝细胞和储脂细胞的简易方法

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jackind
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读

目的 探讨同时分离肝细胞和储脂细胞的有效方法.方法采用门静脉胶原酶灌注消化法同时分离大鼠肝细胞和储脂细胞,先用300r/min(20℃)低速离心5 min,将细胞悬液分成上清和沉淀两部分并分别放入两个离心管中.A管为沉淀部分(肝细胞悬液)经0.02%胶原酶孵育液孵育10min(37℃ 5%CO2),100目网过滤,离心后即为肝细胞.B管为上清部分主要是储脂细胞,经胶原酶恒温震荡消化(200r/min,37℃),200目网过滤,Nycodenz液进行梯度离心(3 000r/min)后即得储脂细胞.结果肝细胞存活率和细胞产率分别为 (93.5± 3.5)%和 (2.4± 0.2)×108/大鼠,储脂细胞分别为 (94.5± 3.5)%和 (2.3± 0.4)×107/大鼠.肝细胞组织学及组织化学检测肝细胞形态正常,细胞培养功能表达正常.储脂细胞在激发波长为328 nm的荧光显微镜下发出蓝绿色荧光,细胞培养贴壁良好.结论一步法同时分离肝细胞和储脂细胞是一种简单有效的方法。

其他文献
目的 评价非亲缘异基因骨髓移植 (allo BMT)治疗恶性血液病的疗效及并发症。方法 予 13例恶性血液病患者非亲缘allo BMT ,预处理方案髓系白血病为改良BUCY ;急性淋巴细胞白
目的 研究拉米夫定停药后慢性乙型肝炎复发病例的临床特点和相关因素.方法随访调查拉米夫定停药后复发的慢性乙型肝炎患者,记录用药前病程、诊断,拉米夫定用量、疗程、疗效、停药原因,用药前、停药时和复发后的生化指标、免疫学指标、病毒学指标及YMDD变异、前C区变异情况及预后.结果46例纳入研究,其中32.6%疗程不足52周;停药时93.6%乙型肝炎病毒(HBV)DNA转阴者复发时均阳转,6.4%未转阴者复
目的 观察心肌短暂缺血后血管内皮生长因子(VEGF)表达的时间规律.方法阻断50只新西兰兔冠状动脉制作心肌缺血模型,分为对照组(S)、缺血组(0h)及再灌注组(亚组:1h,2h,3h,4h,5h,6h,7h).采用Western Blotting法检测缺血和非缺血区心肌VEGF,酶联吸附试验检测外周血心肌肌钙蛋白(CTn-I).结果(1)再灌注5h CTn-I无显著增高(P=0.863).(2)缺
目的研究与比较东莨菪碱和曲马多治疗剖宫产产妇寒战的效果.方法ASA Ⅰ,Ⅱ级剖宫产患者60例,随机分为A,B和C 3组.A组20例为对照组,B组20例为静注东莨菪碱0.3ng组;C组20例为静
目的 阐明鳃裂癌的诊断需慎重。方法 对4例误诊为鳃裂癌的颈部囊性转移性鳞癌进行回顾性分析。结果 4例颈部囊性转移性鳞癌患者的原发灶均被发现,2例原发灶在杓会厌皱裂,1例在腭扁桃体,1例在头顶皮肤。原发灶发现的时间为自首次手术时至首次手术后41个月。结论 4例中无一例为鳃裂癌。因此鳃裂癌的诊断需有严格的诊断标准。
背景:临床观察发现高血压及冠心病患者普遍存在左心房扩大,但左房扩大的发生机制及临床意义尚未完全明了.目的:探讨高血压及冠心病患者左心房内径的变化的临床意义及其与心功
目的:探讨良性前列腺增生(BPH)患者评判膀胱出口梗阻(BOO)程度临床指标的应用价值.方法:358例BPH患者,根据膀胱镜下前列腺尿道梗阻的程度分为3级:1级为轻度梗阻;2级为中度梗
目的 建立基于CD4分子和MHC Ⅱ类分子相互作用的细胞黏附模型. 方法 RT-PCR扩增人源性CD4胞浆缺陷型基因,克隆入绿色荧光表达载体pEGFP-N1中.将pEGFP-N1/CD4转染HEK293细胞,G418筛选稳定克隆.利用Western blot方法及激光共聚焦显微技术检测和观察细胞中CD4分子的表达及定位. 结果 RT-PCR、Western blot法分别从mRNA及蛋白水平检测到
目的 探讨18F-脱氧葡萄糖-正电子发射体层显像(18F-FDG PET)在非小细胞肺癌(NSCLC)临床分期中的价值。方法 105例NSCLC患者于放射治疗前行18F-FDG PET检查,进行PET分期,并将PET分期和CT分期结果进行比较分析。结果 18F-FDG PET扫描使38例NSCLC患者分期改变,其中分期升级31例,分期降级7例。21例分期升级者PET检查发现了远处转移灶,其治疗方案
目的观察充血性心力衰竭(CHF)中医辨证分型与甲状腺激素(T3、T4、TSH)、心房利钠多肽(ANP)、心功能参数[左室射血分数(LVEF)、平均周缘纤维缩短速度(mVcf)、A峰/E峰(A/E)]的