【摘 要】
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目的 观察促肾上腺皮质释放因子(corticotrophin-releasing factor CRF)对结肠上皮细胞系HT-29细胞中Toll样受体(TLR)4/核因子(NF)-κB的表达调控作用。方法 将HT-29细胞分为4组，正常对照组，脂多糖(LPS)组（IPS 20μg/ml刺激24 h），CRF组(CRF 20 ng/ml刺激24h)，CRF+LPS组（预先CRF孵育12h，更换细胞液
【机 构】
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450014，郑州大学第二附属医院消化科,450014，郑州大学第二附属医院消化科,450014，郑州大学第二附属医院消化科,450014，郑州大学第二附属医院消化科
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目的 观察促肾上腺皮质释放因子(corticotrophin-releasing factor CRF)对结肠上皮细胞系HT-29细胞中Toll样受体(TLR)4/核因子(NF)-κB的表达调控作用。方法 将HT-29细胞分为4组，正常对照组，脂多糖(LPS)组（IPS 20μg/ml刺激24 h），CRF组(CRF 20 ng/ml刺激24h)，CRF+LPS组（预先CRF孵育12h，更换细胞液后再与LPS孵育12h）。刺激结束后，RT-PCR法检测各组细胞中TLR4 mRNA的表达，提取细胞总蛋白，免疫印迹法检测各组细胞中TLR4和NF-κB p65蛋白表达水平。收集上清液，ELISA法检测各组细胞上清液中IL-8的表达。结果 LPS组TLR4 mRNA和蛋白表达水平为0.31±0.04和0.48±0.17，与正常对照组比较差异无统计学意义[0.28±0.02和0.45±0.12，t值分别＝0.216和0.712，P值均＞0.05]，CRF组为1.05±0.06和1.08±0.21，与正常对照组相比明显增高（t值分别＝3.721和3.802，P值均＜0.05），而CRF+ LPS组为1.68±0.05和1.81±0.18，更高于CRF组（t值分别＝4.816和3.918，P值均＜0.05）。各组HT-29细胞中NF-κB p65蛋白表达水平和细胞上清液中IL-8表达水平，与TLR4 mRNA和蛋白表达水平结果一致。结论 CRF不仅能直接刺激肠上皮细胞中TLR4/NF-κB通路活化，还可促进结肠上皮对LPS的反应增加，导致IL-8释放增多。
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