观察截短型p63(ΔNp63)基因沉默对胰腺癌PANC1细胞增殖的影响。
方法采用实时PCR检测23例胰腺癌及其配对癌旁正常胰腺组织ΔNp63mRNA的表达；采用蛋白质印迹法检测人正常胰腺导管上皮细胞株HPDE6-C7及人胰腺癌细胞株PANC1、CFPAC-1、BxPC3的ΔNp63蛋白表达。采用脂质体法将靶向ΔNp63的siRNA(ΔNp63-siRNA)及对照siRNA(Con-siRNA)转染PANC1细胞，以未转染的PANC1细胞作为对照组，检测转染细胞ΔNp63 mRNA及蛋白表达以验证ΔNp63基因沉默效应。采用MTT法和BrdU法检测转染细胞的增殖及DNA合成能力的变化。
结果23例胰腺癌及配对癌旁正常胰腺组织ΔNp63 mRNA表达量分别为0.99±0.07、0.70±0.07，癌组织的表达量显著高于正常胰腺组织，差异有统计学意义(P＝0.0034)。HPDE6-C7及PANC1、CFPAC-1、BxPC3细胞ΔNp63蛋白表达量分别为0.97±0.09、3.06±0.16、2.57±0.11、2.45±0.08，3株胰腺癌细胞的表达量较HPDE6-C7细胞升高，差异均有统计学意义(P值均<0.01)。对照组、Con-siRNA组、ΔNp63-siRNA组PANC1细胞ΔNp63mRNA表达量分别为0.97±0.07、0.97±0.07、0.28±0.03，蛋白表达量分别为0.97±0.06、1.00±0.10、0.26±0.03，ΔNp63-siRNA组均较Con-siRNA组显著下调，差异有统计学意义(P值均<0.01)。ΔNp63-siRNA组细胞生长受到抑制，与Con-siRNA组及对照组差异均有统计学意义(P值均<0.01)。3组培养24 h时DNA合成量(A490值)分别为0.55±0.04、0.56±0.01、0.55±0.00；培养48 h时分别为0.84±0.05、0.87±0.07、0.71±0.05。48 h时ΔNp63-siRNA组细胞DNA合成能力较Con-siRNA组及对照组显著下降，差异均有统计学意义(P值均<0.05)，而Con-siRNA组与对照组间的差异无统计学意义。
结论沉默ΔNp63基因可显著抑制胰腺癌PANC1细胞的增殖及DNA合成。