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目的：探索无血清培养H3N2流感病毒冷适应株的适宜条件。方法以无血清适应的Vero细胞为介质，对流感病毒冷适应株（H3N2）的培养条件进行优化，以得到较优的基础培养基、pH值、TPCK胰酶添加量及其补加时间、病毒接种量和病毒收获时间。结果 H3N2流感病毒冷适应株能够感染无血清适应的Vero细胞；经过优化，病毒培养液适宜pH为7．15-7．64， BSA和TPCK胰酶添加量均为0．8-1．2μg／ml，细胞培养36h接种病毒，接种量MOI为0．05-0．10，于25℃培养168h收获时病毒效价达最高。结论