熊果酸对HepG2细胞AMPK和LPIN1表达的影响

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目的:研究野艾蒿(Artemisia lavandulaefolia DC.)中萜类化合物熊果酸(ursolic acid)对HepG2细胞AMPK和LPIN1表达的影响,从分子水平探明其降血脂的有效成分。方法:以HepG2细胞为研究对象,用细胞毒性实验(MTT法)观察熊果酸在不同用药浓度下对HepG2细胞增殖的影响,并筛选最佳实验条件。将细胞分为对照组和药物组,分别抽提两组细胞总RNA与总蛋白,RT-PCR检测LPIN1,AMPKα1和AMPKα2 mRNA表达量,Western Blot检测LPIN1,AMPKα1,AMPKα2和p-AMPK蛋白表达量。结果:熊果酸可不同程度抑制HepG2细胞的增殖。RT-PCR结果显示,熊果酸AMPKα1,AMPKα2 mRNA表达量与对照组比较均无显著差异(P> 0. 05); LPIN1 mRNA表达量与对照组比较有显著性差异(P <0. 01)。Western Blot结果显示,熊果酸AMPKα1蛋白表达量与对照组比较无显著性差异(P> 0. 05),AMPKα2表达量有显著性差异(P <0. 05); LPIN1表达量有显著性差异(P <0. 01); p-AMPK表达量有显著性差异(P <0. 01),且表达水平升高。结论:熊果酸可不同程度抑制HepG2细胞的增殖。熊果酸对HepG2细胞AMPKα1基因和蛋白表达均无显著性差异,但可提高AMPKα2蛋白表达量。同时可显著降低LPIN1基因和蛋白表达水平;可使p-AMPK蛋白表达量升高,提示熊果酸可能是通过激活AMPK磷酸化,使其活化。
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