拟穴青蟹ISSR—PCR条件的优化

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分析DNA模板、Mg2+、dNTPs、引物和TaqDNA聚合酶及甲酰胺、二甲基亚砜等对拟穴青蟹ISSR—PCR反应的影响。研究结果确定了获得清晰条带的模板DNA、Mg2+、dNTPs、引物、TaqDNA聚合酶的浓度范围分别为:模板DNA8~50ng/μl,TaqDNA聚合酶0.75~1.0U,Mg2+1.0~2.0mmol/L(与引物密切相关),dNTP0.15~O.20mmol/L,引物浓度0.6~O.8μmol/L。甲酰胺的添加并不能优化拟穴青蟹ISSR—PCR反应结果,而低浓度的二甲基亚砜可提高扩增
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