【摘 要】
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用碱裂解法对鹅细小病毒延边分离株进行GPV基因组DNA提取。根据已发表的鹅细小病毒VP3基因序列,设计1对含有EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位点的引物,以GPV基因组DNA为模板,应用PCR扩增
【基金项目】
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吉林省牧业管理局项目（编号：吉牧科字第200902号）.
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用碱裂解法对鹅细小病毒延边分离株进行GPV基因组DNA提取。根据已发表的鹅细小病毒VP3基因序列,设计1对含有EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位点的引物,以GPV基因组DNA为模板,应用PCR扩增出VP3基因片段,将VP3基因与克隆载体pMD 18-T连接,转化到感受态大肠杆菌BL21中进行克隆。用EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切该片段并回收该片段,将此基因片段克隆至相同酶切回收后的pVAXI真核表达载体中,获得重组质粒pVAXI-VP3,经PCR鉴定,限制性内切酶双酶切分析和克隆片段序列测定比较,证实了重组质粒的
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