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ES细胞体外生长的环境要求极为苛刻.原则上应满足两个条件:①促进细胞的分裂增殖;②抑制细胞的分化.前者受到基本培养基、添加剂,血清和生长因子的影响,后者则涉及到动物早期胚胎的胚龄和饲养层细胞种类的选择、条件培养基和生长因子的运用以及其它类型细胞(如滋胚层细胞)的影响.不同动物胚胎在体内发育有不同特点.对体外生长的环境要求不同,针对不同动物,应采取相应的策略,才能建立起真正的ES细胞.