【摘 要】
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为了制备用于噬菌体展示肽库的筛选及鉴定等环节的辣根过氧化物酶(HRP)标记的兔抗丝状噬菌体(M13)衣壳蛋白抗体,试验制备了兔源的M13KE多克隆抗体,将多克隆抗体经饱和硫酸铵
【基金项目】
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“十二五”国家科技支撑计划项目(2012BAD12B05;2012BAD12B03);现代农业(奶牛)产业技术体系项目(CARS-37);黑龙江省科技攻关项目(GA09B302)
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为了制备用于噬菌体展示肽库的筛选及鉴定等环节的辣根过氧化物酶(HRP)标记的兔抗丝状噬菌体(M13)衣壳蛋白抗体,试验制备了兔源的M13KE多克隆抗体,将多克隆抗体经饱和硫酸铵法和Protein G Resin层析柱纯化后运用过碘酸钠法对其进行辣根过氧化物酶标记,对标记前和标记后纯化产物进行活性测定,同时对标记后产物进行Western-blot鉴定,以及将其应用到验证已知的阳性噬菌体H11、H12、H14、H16、H18中。结果表明:兔抗M13KE多克隆抗体效价高于1∶32 000,标记后活性高于1∶4 000,标记抗体与已知阳性噬菌体的ELISA鉴定结果与前期测序结果一致。说明此酶标抗体有一定的应用价值。
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