重组人脂联素基因构建、表达、纯化及活性鉴定

来源 :厦门大学学报:自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dlxfmc
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根据脂联素cDNA序列设计并合成9条寡聚核苷酸片段,经重叠PCR技术获得重组人脂联素基因.构建pET-22b(+)/ADPN表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达.目的蛋白以包涵体的形式表达,表达量占菌体总蛋白的30%以上.表达产物通过Ni—NTA柱纯化,SDS-PAGE分析显示,其分子量约为30ku,与预期结果一致.内皮细胞生长抑制实验证实.重组人脂联素生理浓度下具有抑制人内皮细胞生长的活性并呈时间依赖性.以上工作为进一步研究脂联素的生物学功能奠定了基础.
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