pSC101-pMB1质粒双复制子质粒的构建

来源 :江西医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：loveqwg

【摘要】

：

目的构建带有pSC101和pMB1复制子的质粒。方法将pSC101、pUC19（pMB1型复制子）分别用Eco-RI限制性内切酶消化后，DNA连接酶连接.车睾化大肠杆菌DH5a，筛选重组子，提取质粒电泳分析；氯

【作者】

：

莫冰余克花

【机构】

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南昌大学基础医学院微生物学教研室,南昌大学医学实验教学部

【出处】

：

江西医学院学报

【发表日期】

：

2009年8期

【关键词】

：

质粒复制子构建

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目的构建带有pSC101和pMB1复制子的质粒。方法将pSC101、pUC19（pMB1型复制子）分别用Eco-RI限制性内切酶消化后，DNA连接酶连接.车睾化大肠杆菌DH5a，筛选重组子，提取质粒电泳分析；氯霉素培养条件下提取双复制子质粒及其检测OD260值，并将双复制子质粒转化ploA-大肠杆菌。结果阳性重组子带有1个11.9kb质粒，该质粒带有氨苄青霉素和四环素耐药基因的质粒，氯霉素培养条件下双复制子质粒的提取物OD260值增加，并能转化ploA-大肠杆菌。结论构建的质粒带有pSC101和pMB12

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