三聚氰胺免疫亲和柱的制备和测试

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制备高容量的三聚氰胺免疫亲和层析柱,以识别三聚氰胺的单克隆抗体为配体,采用硅烷化方法,对抗体进行包埋,装填小柱。采用三聚氰胺系列标准溶液进行富集试验,通过紫外光谱(三聚氰胺最大紫外吸收波长240 nm)和液相色谱-质谱测试流出液和洗脱液中三聚氰胺的浓度,确定了免疫亲和柱的柱容量为16.47μg。试验中对亲和小柱的润洗溶液、上样溶液、洗脱溶液和再生溶液进行了优化,结果表明,该免疫亲和层析柱的富集效率可达66倍。以回收率高于60%计,该柱的再生次数至少为5次。
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