【摘 要】
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目的:从人单核细胞株THP-1中分离与纯化HMGN2抗菌肽,应用HepG2.2.15细胞株作为体外抗乙型肝炎病毒的实验模型,以探讨HMGN2分子的抗HBV作用。方法:采用HPLC分离纯化,Tricine-S
【机 构】
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四川省医学科学院·四川省人民医院药剂科,
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目的:从人单核细胞株THP-1中分离与纯化HMGN2抗菌肽,应用HepG2.2.15细胞株作为体外抗乙型肝炎病毒的实验模型,以探讨HMGN2分子的抗HBV作用。方法:采用HPLC分离纯化,Tricine-SDS-PAGE电泳、质谱精确分子量测定、Western blotting对分离纯化得到的HMGN2分子进行分子鉴定。以HBV DNA转染的细胞株HepG2.2.15细胞为模型,用不同浓度HMGN2分子作用于HepG2.2.15细胞,分别在第4天和第8天收集细胞培养上清液,ELISA检测上清中HBV表面抗原(HBsAg)及e抗原(HBeAg),采用实时荧光定量PCR法检测上清液HBV DNA的含量。结果:从人单核细胞株THP-1中分离纯化获得纯度较高的HMGN2蛋白;其在1~100 mg·L-1范围内,对HepG2.2.15细胞无细胞毒性;HMGN2蛋白分子在1~5 mg·L-1水平即可显著抑制HBeAg和HBsAg的表达,可显著降低HBV DNA拷贝数,继续增加剂量抗病毒效果不再明显增加。结论:HMGN2在体外细胞培养中具有直接抗HBV活性。
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