LCRG1基因5′端调控区域的克隆及活性测定

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背景与目的:LCRGl基因的调控机制至今不清楚,本研究拟克隆LCRGl基因的转录起始区上游序列,寻找与其表达有关的调控序列。方法:利用生物信息学技术预测LCRGl基因5’端调控区域的启动子活性区域,采用PCR方法从人基因组DNA中扩增LCRGl基因5’端调控区域1.776kb(-1191bp-+585 bp)片段,并将其构建到荧光素酶报告基因pGL3 basic载体中。与内参照质粒PhRL—SV40共转染COS7细胞,通过双荧光素酶活性检验测定其启动子活性。结果:成功扩增LCRGl基因5’端调控区域1.7
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