【摘 要】
：
目的 探讨人类表皮生长因子受体2（Her-2）靶向重组型caspase-6融合蛋白对骨肉瘤的促凋亡作用.方法 将抗Her-2单链抗体基因e23sFv、绿脓杆菌外毒素PE的转膜结构域基因（PEⅡ）和重组型caspage-6基因连接,构建成Immunocasp-6（e23sFv-PE Ⅱ-casp-6）融合蛋白,将其亚克隆入真核表达载体pCMV中,构建pCMV-e23sfv-PE Ⅱ-caspase-
【机 构】
：
解放军第四五八医院骨科,广州510602,第四军医大学唐都医院骨肿瘤研究所,第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室,第四军医大学唐都医院骨肿瘤研究所
论文部分内容阅读
目的 探讨人类表皮生长因子受体2（Her-2）靶向重组型caspase-6融合蛋白对骨肉瘤的促凋亡作用.方法 将抗Her-2单链抗体基因e23sFv、绿脓杆菌外毒素PE的转膜结构域基因（PEⅡ）和重组型caspage-6基因连接,构建成Immunocasp-6（e23sFv-PE Ⅱ-casp-6）融合蛋白,将其亚克隆入真核表达载体pCMV中,构建pCMV-e23sfv-PE Ⅱ-caspase-6载体（简称pCMV-6）.将荷瘤裸鼠随机分为治疗组和对照组,采用阳离子脂质体包裹法,将pCMV-6和pCMV分别肌肉注射入荷瘤裸鼠身上,观察肿瘤体积和裸鼠体重的变化,并称取肿瘤重量.采用HE染色法观察肿瘤组织形态学变化,采用末端脱氧核苷酸转移酶标记技术（TUNEL）检测肿瘤组织的凋亡形态,采用免疫组织化学染色检测目的基因的表达.结果 对照组的肿瘤体积、肿瘤重量和裸鼠体重分别为（975.09±49.76）mm3、（1.08±0.16）g和（4.07±0.49）g,治疗组分别为（376.01±265.18）mm2、（0.64±0.18）g和（6.20±1.14）g.HE染色和TUNEL法检测显示,治疗组裸鼠肿瘤组织呈现出典型的凋亡特性,而对照组裸鼠肿瘤组织结构正常.免疫组织化学染色显示,caspase-6在治疗组裸鼠肿瘤组织中呈阳性,而在对照组肿瘤组织和肌肉组织中呈阴性.结论 人重组型caspase-6融合蛋白能靶向性识别、结合Her-2阳性的骨肉瘤细胞,并诱导其发生凋亡,为骨肉瘤的临床治疗提供了一定的实验基础.
其他文献
社会学理论对于信任的作用给予了高度的肯定,认为在现代社会,系统功能的实现依赖于信任在组织和个人之间的扩散[1].信任程度的提高是降低交易成本的有效途径之一[2]。
在4月25日举行的医疗卫生职业精神座谈会上，卫生部党组书记、副部长张茅发表了重要讲话，阐述了全国卫生系统开展职业精神大讨论活动的意义，并提出了对活动的要求。北京市卫生局、上海市卫生局、广东省卫生厅的有关领导介绍了当地医疗卫生系统职业精神、医院文化建设的情况？北京大学医学部副主任王宪、中华医学会医学伦理学分会主任委员李义庭、北京协和医学院出版社社长袁钟等专家进行主题发言，从不同角度对卫生系统核-心价
目的 探讨皮质类固醇激素所致的皮炎发病因素、临床表现及治疗.方法收集我院门诊2000年2月至2003年2月资料完整282例病例进行临床分析.结果282例患者,分别外用皮康王霜、皮炎平霜、肤轻松霜等.或外用2种以上皮质类固醇制剂,人均用药时间为2～13个月,人均用药量30～162 g.其临床表现为红斑、干燥、脱屑282例(100%),毛细血管扩张159例(56.38%),毛囊性炎性丘疹145例(51
目的 研究过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)激动剂罗格列酮(rosiglitazone,Ros)抑制血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的人增生性瘢痕成纤维细胞增殖、细胞外基质合成,并探讨其抗瘢痕的潜在作用.方法 体外培养人增生性瘢痕成纤维细胞,在一定浓度的AngⅡ、Ros、GW9662作用下,采用CCK-8法、实时荧光定量RT-PCR和Western blot印迹法分
目的 观察应用张力带钢丝内固定治疗肩锁关节脱位的疗效.方法对我院自1995年1月至2003年10月采用张力带钢丝内固定治疗肩锁关节脱位38例,随访平均1年3个月,按优、良、差标准评定疗效.结果优31例,占81.5%,良7例,占18.4%,无一例出现并发症,均获得满意疗效.结论张力带钢丝内固定治疗肩锁关节脱位,具有固定牢固,能早期功能锻炼.操作简单易行,副损伤小,疗效肯定。
目的 探讨富含血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)对小鼠触须毛乳头细胞(dermal papilla cells,DPCs)活性和毛囊重建的影响.方法 将采用2步离心法制备的PRP与采用显微解剖法获得的DPCs共培养,显微镜下观察细胞的形态变化,通过MTT法检测第4和第8代DPCs细胞活性.将新鲜分离的C57BL/6J小鼠背部表皮细胞与第4代的DPCs混合制成含有不同终浓
目的 评估胸腔镜下胸交感神经干切断术治疗手、腋窝和足多汗症的有效性和安全性.方法自2003年1月至10月,40例多汗症患者经电视胸腔镜行双侧胸交感神经干切断术.男21例,女19例,平均年龄23.8岁(10～53岁).术中均用电凝钩烧灼切断胸2～4交感神经干.结果全组40例术后手和腋窝多汗症状全部消失,其中35例伴随的足底多汗症状也同时消失,另5例减少,4例出现转移代偿性多汗.全组无手术死亡和严重并