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通过固定化金属离子亲和层析进行柱上复性与纯化，获得高纯度的可溶性PD-L1胞外域（sPD-L1），其纯度达95％，纯化的sPD-L1经免疫印迹分析得到验证，并具有与其受体PD-1的特异性结合活性；以该抗原免疫小鼠获得高滴度的抗血清，并以制备的sPD-L1-HiTrap亲和层析柱纯化获得高纯度特异性抗体；将该抗体与另一商业化抗体结合建立了一种灵敏的双夹心ELISA法，检测范围为1ng／mL～100ng／mL，可用于分析可溶性PD-L1的含量。可溶性sPD-L1及其抗体的制备不仅可用于人体内特异性抗体和可溶性